论文部分内容阅读
细胞周期(cell cycle)是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程,分为间期与分裂期两个阶段。其中,间期分为三期、即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)与DNA合成后期(G2期)。细胞分裂期分为:前期(prophase)、中期(metaphase)、后期(anaphase)、末期(telophase)。在有丝分裂过程中,细胞把遗传物质均等地分配给两个子细胞,这是生物体正常生长、发育和繁殖的基础。视黄素X受体α(RXRα)属于核受体超家族中的重要成员,从胚胎形成,器官成熟,到生长发育,新陈代谢,RXR α的功能贯穿在整个生命体的生命过程的始终。关于核受体对细胞周期调控的研究仍比较少,目前已有初步报道的对细胞周期有调控作用的核受体只有TLX、ER、AR、PPARγ等,而对于RXRα在细胞周期中的具体功能,还是一个有待探究的领域。在RXRα的A区到F区当中,以往的研究往往集中在对RXRα的DNA结合区(C区)和配体结合区(E区),而对于A/B区域的功能的了解仍然非常有限。曾有研究者观察到CDKl/cyclinBl磷酸化鼠源的RXRα的现象,且缺失掉RXRα的A/B区后该磷酸化消失,暗示磷酸化位点可能就在A/B区,但当时没有对该现象进行更深一步的研究;并且有研究者发现:在小鼠中敲除掉RXR α的A/B区后,小鼠的胎盘和胚胎发育受到影响,并形成胎儿维生素A缺乏症(VAD)综合征样的畸形和发育缺陷,但具体的分子机制未能得到揭示。CDK1是细胞周期中最重要的调控蛋白之一,它由cdc2基因编码,分子量约在34kD。该蛋白为丝/苏氨酸蛋白激酶,它同时调控着细胞周期G1/S,G2/M期的两个检验点。CDK1与cyclinBl组成的复合物控制着细胞从G2期间进入M期,和退出M期的功能。本课题研究发现,在分裂期,RXRα能够与CDKl/cyclinB1复合物相互作用,并且RXRα A/B区上的56位和70位丝氨酸被CDK1/cyclinB1磷酸化,从而导致RXRα产生分子量增加15KD左右的磷酸化修饰形态。使自身产生分子量增加15kDa的修饰形态。该修饰形态的RXRα对于细胞的有丝分裂过程是必要的。实验表明,过表达RXRα会引起细胞分裂进程加快,干扰RXRα则引起分裂期进程减慢,并导致细胞不能正常分裂而产生异常双核或多核,外转RXR α的模拟磷酸化突变体((RXRα-S56/70D)则能够使细胞恢复正常,而外转RXRα的磷酸化失活突变体(RXRα-S56/70A)不能够使细胞恢复正常。综上所述,RXRα是CDK1激酶的底物;CDK1/cyclinB1与RXRα相互作用而将RXRα的A/B区56位和70位丝氨酸磷酸化,从而在细胞周期中,维持有丝分裂的正常进行,并且报告基因结果显示,56位和70位丝氨酸的模拟磷酸化并不影响RXRα转录活性,故56位和70·位丝氨酸磷酸化的RXRα很有可能行使的是非基因型功能本研究第一次揭示了 RXRα对细胞周期的调控作用,该发现拓展了对RXRαA/B区的认识,为RXRα的研究开辟出全新的领域,也对核受体调控细胞周期这一研究领域进行了拓展;同时亦是对CDK1调控细胞周期的具体机制的重要补充,并为更深入的理解细胞周期运转的分子机制增加了全新的认识。