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目的：以逆转录病毒作为载体，将端粒酶抑制基因导入肝癌细胞，研究其对肝癌体内外生长的抑制作用，为肝癌的基因治疗提供新途径。 方法：使用逆转录病毒质粒载体pLXSN构建的真核表达重组质粒pLXSN-hTR，携带反义端粒酶RNA基因，将其用电穿孔的方法转染包装细胞PT67细胞，G418筛选抗性细胞，获取阳性细胞克隆株，即稳定表达病毒的产病毒细胞株，收集细胞上清液，浓缩得到重组逆转录病毒，用NIH3T3细胞测定病毒滴度。将浓缩后的病毒直接感染人肝癌细胞株Bel-7402，PCR检测目的基因的插入，端粒酶反义RNA组分整合入肝癌细胞基因组中，通过其在细胞内与hTR结合而抑制肝癌细胞端粒酶活性，从而抑制肝癌细胞的生长，并促进癌细胞的凋亡。本实验通过细胞生长曲线、MTT法与流式细胞检测细胞生长抑制率和凋亡情况。 采用Bel-7402细胞株建立裸鼠人肝癌皮下移植瘤模型。待肿瘤长至约5mm时采用随机数字法将裸鼠分为A、B、C、D、E、F 6组，分别给每组裸鼠腹腔注射5-Fu、生理盐水、5-Fu、5-Fu、生理盐水、生理盐水，同时分别局部注射质粒BamHl、质粒BamHl、生理盐水、质粒EcoRl、 质粒EcoRl、生理盐水。隔日注药一次，共三次。测量肿瘤体积，绘制各组肿瘤的生长曲线，计算抑瘤率。实验结束后处死动物，对移植瘤组织进行HE染色，光镜下观察瘤组织的形态学改变，TUNEL法检测瘤组织内肿瘤细胞的凋亡指数。 结果：反义端粒酶RNA基因和5-Fu均能抑制Bel-7402的体外、体内生长，两者联合应用能明显增加疗效。从细胞生长曲线，细胞生长抑制率，MTT均可以看出A组抑制最明显。 反义端粒酶RNA基因和5-Fu能不同程度引起Bel-7402细胞的体内、体外凋亡坏死。流式细胞显示A组(71-71±2.53)％，B组(61.32±2.24)％，