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目的观察非诺贝特对严重烫伤小鼠应激状态下胰岛素抵抗的作用。方法1.烫伤小鼠模型建立与分组选择健康SPF级昆明小鼠130只(中国军事医学科学院实验动物中心提供),雌雄各半,体质量(30±2)g,鼠龄6～8周。自由进食饮水,适应性喂养1周后按随机数字表随机分成4组,低剂量组(Ⅰ)、高剂量组(Ⅱ)和对照组(Ⅲ)各40只,正常组10只。烫伤组小鼠背部按30%TBS A用6%Na2S试剂退毛,腹腔注射4%水合氯醛(40mg·kg-1)麻醉,麻醉满意后将小鼠背部置于100℃热水中烫12s,制成烫伤面积为30%的Ⅲ°烫伤模型(病理切片证实),烫伤后立即腹腔注射乳酸钠林格液(40mg· kg-1)2mL复苏。建模成功后于每日晨8时Ⅲ组予以0.5mL·d-1生理盐水灌胃,Ⅰ、Ⅱ组分别予以30mg· kg-1· d-1、100mg· kg-1· d-1非诺贝特灌胃。2.血清标本的采集实验动物禁食过夜,断头取血。正常组10只一次性处死,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别于1、3、7、14d各处死10只,所收集血液标本2mL于3000r/min、20min、4℃离心,收集血清0.5mL于-80℃保存待测。3.空腹血糖(FBG)测定各组小鼠分别在第1、3、7、14天处死时用一次性血糖试纸和血糖仪即时测量FBG。4.血清胰岛素、TNF-α和FFA测定将制备好的血清从-80℃冰箱中取出,先放入4℃冰箱复温24h,再移至常温待用。运用ELISA试剂盒测试血清胰岛素、TNF-α水平,运用比色法检测FFA水平。5.稳态模式法(HOMA)计算胰岛素抵抗指数值胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)=FBG(mmol/L) X FIns(mIU/L)/22.5。6.肝组织病理切片制作各组小鼠处死后,迅速切取大小约1.0cm×1.0cm×0.2cm肝组织3块(肝包膜在内),置于10%甲醛溶液中固定,经脱水、石蜡包埋、切片,HE染色后,在光学显微镜下进行肝组织病理学观察。7.统计学处理采用SPSS18.0进行数据的统计和处理。计量资料数据以x+s表示,采用单因素方差分析(ANOVA),两两比较采用LSD-t法检验,双变量关联性分析采用直线相关分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果1各组小鼠不同时间点HOMA-IR值比较正常组小鼠HOMA-IR值为4.03±0.95。烫伤后各组小鼠在第1、3、7天HOMA-IR值均高于正常组,Ⅰ组和Ⅱ组HOMA-IR值均低于Ⅲ组(P<0.01),但Ⅰ组和Ⅱ组在同一时间点均值比较差异无统计学意义(P>0.05)。第14天Ⅰ组和Ⅱ组HOMA-IR值接近于正常组,但Ⅲ组HOMA-IR值仍高于正常组。在同一组内不同时间点之间均数比较差异均有统计学意义(P<0.05)。且分别与正常组HOMA-IR值比较,亦均存在差异(P<0.05)。2血清TNF-α水平变化正常组小鼠血清TNF-α水平为(379.40±50.59)pg/mL。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各组小鼠在伤后第1、3、7天血清TNF-α水平均高于正常组,Ⅰ组和Ⅱ组血清TNF-α水平均低于Ⅲ组(P<0.05或P<0.01),但Ⅰ组和Ⅱ组在同一时间点均值比较差异无统计学意义(P>0.05)。第14天Ⅰ组和Ⅱ组血清TNF-α水平接近于正常组,但Ⅲ组血清TNF-α水平仍高于正常组。各组不同时间点比较差异均有统计学意义(P<0.05)。3血清中FFA水平变化正常组小鼠FFA值为(0.38±0.22) mmol/L。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各组小鼠在伤后第1、3天血清FFA水平均高于正常组,Ⅰ组和Ⅱ组血清FFA水平均低于Ⅲ组(P<0.05或P<0.01),但Ⅰ组和Ⅱ组在同一时间点均值比较差异无统计学意义(P>0.05)。第7天各组小鼠血清FFA水平仍较高,第14天Ⅰ组和Ⅱ组血清FFA水平接近于正常组,但Ⅲ组血清FFA水平仍高于正常组。各组不同时间点比较差异均有统计学意义(P<0.05)。4各组烫伤小鼠血清中TNF-α和FFA水平的相关性选取第3天各组小鼠所测得的血清TNF-α和FFA值,进行相关性分析,可知相关系数均大于0,说明两者存在一定的相关性,且成正相关,但P值均大于0.05,说明该相关系数无统计学意义。5烫伤小鼠肝脏病理变化情况正常组小鼠肝细胞呈正常状态；烫伤对照组小鼠镜下见部分肝细胞肿胀,界限模糊,胞浆浅染,内有大小不等的脂滴并部分融合呈空泡样,以第3天最为明显,见图2；低剂量组小鼠肝细胞变性明显轻于对照组。分析可知烫伤后小鼠肝脏有不同程度的脂肪变性,给予非诺贝特干预后,肝脏脂肪变性有所改善。结论烫伤后各组小鼠在第1、3、7天HOMA-IR值均高于正常组,Ⅰ组和Ⅱ组HOMA-IR值均低于Ⅲ组。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各组小鼠血清TNF-α、FFA水平在伤后不同时间点均高于正常组,Ⅰ组和Ⅱ组均低于Ⅲ组(P<0.05或P<0.01),但Ⅰ组和Ⅱ组在同一时间点均值比较差异无统计学意义(P>0.05)。各组不同时间点比较差异均有统计学意义(P<0.05)。烫伤后小鼠肝脏有不同程度的脂肪变性,给予诺贝特干预后,肝脏脂肪变性有所改善。烫伤后小鼠存在着IR,其中第1、3天最为明显,同时血清中TNF-α及FFA水平也明显升高,且随着IR的改善,TNF-α及FFA水平也下降,说明非诺贝特可以降低严重烫伤小鼠IR指数和血清TNF-α及FFA水平,为深入研究改善机体严重烧伤后的应激状态,降低胰岛素抵抗作用提供依据。