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目的:观察金钗石斛总生物碱(Dendrobium nobile Lindl alkaloid,DNLA)对SAMP8小鼠脑衰老的影响,并探讨其作用机制。方法:6月龄SAMP8小鼠随机分为4组:SAMP8模型组、DNLA低、高剂量组、阳性药组,同月龄SAMR1小鼠作为空白对照。药物均用1%的吐温80配制,DNLA低、高剂量组分别给予DNLA 20、40 mg/kg,阳性药组给予二甲双胍80mg/kg,每日一次连续灌胃6个月,SAMR1对照组和SAMP8模型组给予同等体积1%的吐温80。给药结束前,采用Morris水迷宫实验,Y迷宫实验,新物体识别实验,转棒实验,旷场实验等方法检测小鼠学习记忆及运动功能;测定小鼠体重,称取小鼠脑组织湿重,用于测定脑组织湿重比;衰老特异性β-半乳糖苷酶染色检测脑组织衰老情况;H&E和尼氏染色观察海马CA1区和皮质神经元损伤情况;Western blot测定小鼠海马和皮质中衰老蛋白Klotho的表达,Aβ生成及降解途径中Aβ、APP、BACE1、PS1、IDE、NEP蛋白水平,自噬相关蛋白LC3B、Beclin1、P62的表达水平。结果:SAMP8较SAMR1小鼠逃避潜伏期明显延长,原平台象限停留时间缩短,Y迷宫自发探索交替行为正确率降低,探索新物体的时间占总时间的百分比有所下降但无差异,转棒潜伏期缩短,中央区域和外周区域运动的总路程明显缩短;脑组织湿重比降低;β-半乳糖苷酶染色的脑组织衰老细胞数量增多;海马CA1区和皮质神经元损伤,细胞排列紊乱,正常神经元细胞数量减少;海马和皮质Aβ、APP、BACE1、PS1、P62蛋白表达升高,LC3B、Beclin1、IDE、NEP、Klotho蛋白表达降低。与SAMP8模型组相比,DNLA给药及阳性给药组逃避潜伏期缩短,原平台象限停留时间延长,Y迷宫自发探索交替行为正确率升高,探索新物体的时间占总时间的百分比无明显改变,转棒潜伏期延长,中央区域和外周区域运动的总路程无显著改变;脑组织湿重比增加;β-半乳糖苷酶染色的脑组织衰老细胞数量减少;海马CA1区和皮质神经元正常,细胞排列整齐,正常神经元细胞数量增加;海马和皮质Aβ蛋白水平降低,Klotho衰老蛋白水平升高,生成Aβ代谢途径中的APP、BACE1、PS1蛋白水平降低,Aβ降解酶IDE、NEP蛋白水平升高,而自噬相关蛋白P62蛋白水平降低,LC3B、Beclin1蛋白水平升高。结论:本实验条件下,金钗石斛总生物碱对SAMP8小鼠有延缓衰老的作用,其作用机制可能与上调Klotho蛋白,减少Aβ聚集、增强自噬活性有关。