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目的:肝细胞性肝癌(以下简称肝癌)是常见的恶性肿瘤之一,具有高侵袭,转移早,易复发,预后差的临床病理特征。肝癌的转移和复发是一个多步骤的复杂过程,也是影响其疗效的主要因素。许多研究表明,恶性肿瘤的浸润、转移与MMP-9、CD44V6、nm23-H1基因关系密切。MMP-9蛋白降解、破坏靠近肿瘤表面的细胞外基质(ECM);CD44V6蛋白参与了癌细胞与基底膜的粘附,从而促进肿瘤的浸润、转移;nm23-H1具有肿瘤转移抑制作用,被称为肿瘤转移抑制基因。本研究以60例肝癌的手术切除标本为资料,采用免疫组织化学方法,检测MMP-9、CD44V6、nm23-H1在高转移倾向肝癌及低转移倾向肝癌中的表达,探讨它们与肝癌浸润、转移等生物学行为之间的关系,为肝癌转移、复发、预后的预测和临床治疗提供有效依据。 材料与方法:HCC手术标本60例,均为郑州大学一附院病理科1997~2000年存档蜡块,所有患者术前均未行针对肝癌的治疗,标本均经10%福尔马林固定,石蜡包埋,5μm连续切片,切片均经HE染色,由两位病理学医师共同诊断。其中男50例,女10例;年龄18岁~60岁,平均49.5岁;直径≥50cm者30例,直径<5cm者30例,最小直径3cm,最大直径15cm(平均7.5cm);术前AFP浓度≥100ng/ml者28例,术前AFP浓度<100ng/ml者32例;高转移倾向者35例,低转移倾向者25例;按照Edmondson组织学分级标准,Ⅰ级8例,Ⅱ级10例,Ⅲ级13例,Ⅳ级29例。阳性对照:均用已知阳性的乳腺导管癌标本作MMP-9、CD44V6、nm23-H1的阳性对照,结果均为阳性。阴性对照:以已知的阴性切片作阴性对照,结果为阴性。空白对照:以PBS液代替一抗作空白对照,结果为阴郑州大学20(抖届硕士研究生毕业论文MMP一9、CD44v6、nm23一Hl在肝癌组织的表达及意义性。分别使用抗MMP一9、抗CD44V6、抗nln23一Hl单克隆抗体,行免疫组织化学S一P法染色。在切片阳性细胞区随机挑选5个高倍视野共计数1000个肿瘤细胞,在高倍镜下对染色深浅及染色细胞数多少分别计分后相加,<4分为阴性介),)4分为阳性(+)。统计学分析,所有资料均用SPSS10.O软件进行数据处理,a=0.05为检验水准。 结果:1.MMP一9蛋白表达情况:M州[P一9蛋白在高转移倾向组的阳性表达率为71.43%(25/35),而在低转移倾向组的阳性表达率为40.00%(10/25),两组比较有统计学差异(P<0.05)。MMP一9蛋白的表达与性别、年龄、分级、术前Afp值、肿块大小均无关(P>0.05)。 2.CD44V6蛋白表达情况:CD“V6蛋白在高转移倾向组的阳性表达率为68j7%(24/35),而在低转移倾向组的阳性表达率为36.00%(9/25),两组比较有统计学差异俨<0.05)。CD科V6蛋白的表达与性别、年龄、分级、术前AFp值、肿块大小均无关(P>0.05)。 3.nln23一Hl蛋白表达情况:nln23一Hl蛋白在高转移倾向组的阳性表达率为25.71%( 9/35),而在低转移倾向组的阳性表达率为60.00%(15/25),两组比较有统计学差异(尸<0.05)。nln23一Hl蛋白的表达与性别、年龄、分级、术前Afp值、肿块大小均无关(P>0.05)。 4.MMp一9、CD二V6、nm23一Hl表达的相关性:在nm23一Hl表达阳性组24例中MMp一9阳性率为29.14%(v/ 24),而nln23一Hl表达阴性组中MMp一9阳性率为72.22%(26/36),差异有统计学意义伊<0 .05);在nln23一Hl表达阳性组24例中CD44叽阳性率为3333%(8/2叼,而nm23一Hl表达阴性组中cDov6阳性率为69.44%(25/36),差异有统计学意义(P<0 .05);在M州田一9表达阳性组35例中CD科v6阳性率为68.57%(24/35),而MMp一9表达阴性组中CD砰6阳性率为36.00%( 9/25),差异有统计学意义(P<0.05)。 结论:1.MMP一9、CD科V6蛋白表达与肝癌的浸润、转移呈正相关,而nln23一Hl蛋白表达呈负相关。 2.在肝癌的浸润、转移过程中,MMP一9蛋白表达与CD44叭蛋白表达呈正 相关,两者可能具有相互协同作用;nm23一Hl蛋白表达与MMP一9蛋白和CD、V6 蛋白表达呈负相关.,所以联合检测这三种蛋白的表达有利于进一步判断肝癌患郑州大学2004届硕士研究生毕业论文MMP一9、cD44v6、nm23一Hl在肝癌组织的表达及意义者的预后。 3 .MMP一9、CD44v6、nln23一Hl可作为肝癌治疗的靶基因,这种治疗有望成为肝癌治疗的新方法。