目的：为临床上应用间接ELISA方法检测汉赛巴尔通体病原体，本文通过对汉赛巴尔通体 P17基因原核诱导表达，用获得的重组蛋白分析研究间接 ELISA检测方法的最佳条件。　　方法：根据 Genebank上的基因序列，对汉赛巴尔通体特有P17（片段长度为525bp）进行PCR扩增，并克隆到pET-28a载体上。将重组质粒转化到大肠杆菌DH-5α中，用l mmol/LIPTG诱导P17蛋白表达，然后将Ni-NTA柱纯化的目的蛋白作为抗原建立汉赛巴尔通体的人临床间接ELISA检测方法。　　结果：成功获得了分子量为22.6KD、浓度为3.44mg/mL P17基因重组蛋白。建立了间接ELISA方法的最佳条件为：P17基因蛋白稀释浓度为1.25μg/ml，包被37℃2小时，5％脱脂奶37℃封闭1h，待检血清稀释度为1:400，37℃孵育1h，HRP-羊抗人IgG浓度1:5000，37℃孵育1h，底物37℃避光显色25min，阴阳临界值为0.1238。利用已建立的ELISA方法检测上海地区91份和辽宁省393份临床血清样品，阳性血清分别为阳性率为24.17%和19.59%。　　结论：成功建立了人临床汉赛巴尔通体抗体检测的间接ELISA方法，该方法特异性、重复性及敏感性高。此外，应用原核重组表达并纯化的抗原蛋白的方法，具有成本低，操作简便，结果可信等特点，为将本研究中建立的ELISA应用于生产的实践和临床诊断中提供可靠的实验依据和理论基础。