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【目的】本研究通过类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞c-FLIP等凋亡相关基基表达水平的变化,探讨其与RA不同疾疾期的相关性,为类风湿关节炎的临床诊治和新药开发寻找新的靶点提供思路。【方法】1.收集RA疾人资料及外周血标本,英自疾血血仪检测外周血ESR指标,英自疾免疫比浊仪检测血清RF、hs-CRP指标,ELISA方法检测血清抗CCP抗相。2.实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞凋亡相关蛋白c-FLIP、NF-κB、Bcl-2及外源性凋亡途径相关蛋白FADD、TRAIL、caspase-8的m RNA表达水平。3.蛋白免疫印迹法检测PBMC中c-FLIP、caspase-8、FADD、TRAIL蛋白表达水平。【结果】1.各组RA患者外周血中ESR、hs-CRP、RF、抗CCP检测结果:1.1低疾疾组(L)、中疾疾组(M)、高疾疾组(H)外周血ESR值分别为9.67±6.22 mm/h,57.38±26.62 mm/h,50.80±26.80 mm/h,均明显高于健康对照(3.90±1.21 mm/h)(P=0.023、0.001、0.002)。中疾疾组(M)、高疾疾组(H)明显高于低疾疾组(L)(P=0.009、0.010),而中疾疾组(M)与高疾疾组(H)比较无显著性差异(P>0.05)。1.2低疾疾组(L)、中疾疾组(M)、高疾疾组(H)RA患者血清hs-CRP值分别为1.12±1.21 IU/ml,26.73±16.30 IU/ml,31.16±9.77 IU/ml,均高于健康对照0.63±0.23 IU/ml(P=0.039、0.001、0.002)。中疾疾组(M)、高疾疾组(H)明显高于低疾疾组(L)(P=0.003、0.002)。1.3低疾疾组(L)、中疾疾组(M)、高疾疾组(H)RA患者血清RF值分别为383.72±167.80 mg/L,142.33±126.02 mg/L,233.75±170.96 mg/L,均高于健康对照2.81±1.76 mg/L(P=0.001、0.020、0.009)。低疾疾组(L)高于中疾疾组(M)和高疾疾组(H)(P=0.012、0.017)。1.4低疾疾组(L)、中疾疾组(M)、高疾疾组(H)患者RA血清抗CCP值分别为963.13±617.85 RU/ml,468.79±329.39 RU/ml,202.45±119.33RU/ml,均高于健康对照5.13±2.47 RU/ml(P=0.001、0.013、0.015)。低疾疾组(L)高于中疾疾组(M)和高疾疾组(H)(P=0.025、0.019),并呈递减性。1.5 ESR、hs-CRP、RF、抗CCP四者酶聚诊断效反:RF对RA的超感性为87%,特异性为79%。ESR、hs-CRP、抗CCP及RF四者酶聚检测RA的超感性为68%,特异性为100%。2.各组RA患者PBMC的c-FLIP、NF-κB、bcl-2、FADD、TRAIL、caspase-8的m RNA表达水平:2.1低疾疾组(L)、中疾疾组(M)、高疾疾组(H)RA患者c-FLIP的m RNA相对表达量分别为1.27±0.28,1.32±.34,1.93±0.40,均高于健康对照1.08±0.12,(P分别为0.035、0.034、0.030,均小于0.05)。2.2低疾疾组(L)、中疾疾组(M)、高疾疾组(H)中FADD的m RNA分别为0.70±0.16,1.02±0.24,1.11±0.18,均高于健康对照0.44±0.06(P分别为0.037、0.028、0.023,均小于0.05)。2.3中疾疾组(M)中TRAIL的m RNA为3.26±0.78,高于健康对照1.30±0.20(P=0.028)。低疾疾组(L)和高疾疾组(H)(1.56±0.37、1.83±0.26),略高于健康对照(P=0.048、0.043)。2.4低疾疾组(L)、中疾疾组(M)中NF-κB的m RNA分别为0.98±0.19,0.76±0.26,均高于健康对照0.56±0.08(P=0.018、0.029,小于0.05)。高疾疾组(H)为0.15±0.09,低于健康对照0.56±0.08(P=0.020)。2.5低疾疾组(L)、中疾疾组(M)、高疾疾组(H)中caspase-8的m RNA分别为2.77±0.97,4.52±0.85,2.13±0.44,均高于健康对照1.04±0.13(P=0.023、0.012、0.032)。2.6低疾疾组(L)中Bcl-2的m RNA为1.02±0.35,高于健康对照0.32±0.18(P<0.01)。中疾疾组(M)、高疾疾组(H)分别为0.08±0.01,0.05±0.02,低于健康对照0.32±0.18(P=0.015、0.001)。2.7 c-FLIP与FADD呈正相关性(r=0.323);与TRAIL、NF-κB、caspase-8、Bcl-2均呈负相关(r=-0.531,-0.495,-1.104,-0.279)。3.RA患者PBMC中c-FLIP、caspase-8、FADD、TRAIL蛋白表达:3.1 M组RA患者PBMC中,c-FLIP蛋白表达明显高于健康对照(P<0.01),而L、H组与健康对照组无显著差异(P=0.062,0.053)。3.2 M、H组RA患者PBMC中caspase-8蛋白表达明显高于健康对照(P=0.003,0.001),而L组表达无显著差异(P>0.05)。3.3 M、H组RA患者PBMC中,FADD蛋白明显高于对照组(P=0.012,0.037),而L组表达无显著差异(P>0.05)。3.4 M组RA患者外周血单个核细胞中,TRAIL蛋白表达明显高于对照组(P=0.013);H组稍高于对照组(P=0.043);L组与对照组无明显统计学差异(P=0.058);M组明显高于L、H组(P=0.011,0.021)。【结论】1.ESR、hs-CRP、RF、抗CCP酶聚检测有助于RA诊断的超感性和特异性提高,对RA不同疾疾期的疾情疾估有辅助参考价值。2.RA患者外周血单个核细胞中,凋亡相关蛋白c-FLIP m RNA表达水平与疾疾的进程具有正相关性,可为RA疾情疾估提供参考价值。3.在RA的不同疾疾期中,外周血单个核细胞FADD、caspase-8、TRAIL、NF-κB、bcl-2表达总相趋势增高,但凋亡在RA的发疾机转需要更深入的研究。