随着分子生物学和微生物表面展示系统的发展,以酵母为基础的表面展示技术已广泛应用于各类外源蛋白的表达中,是蛋白质工程、酶工程研究的重要工具。解脂耶氏酵母（Yarrowia lipolytica）是公认安全的非常规酵母,其全基因组序列已测序。它不仅能以烷烃类等廉价物质为底物,而且具有易于调控的强组成型启动子,可以分泌多种代谢产物,是目前研究异源蛋白表达的常用宿主,已有40多种异源蛋白在该宿主中表达。低聚半乳糖（GOS）作为人体益生元,广泛应用于烘焙、发酵、饮料、各种配方奶粉等食品领域。通常,低聚半乳糖由β-半乳糖苷酶催化乳糖发生转糖基反应而来,常用方法包括酶法合成、发酵法、固定化酶、转化方法等,但在工业生产中存在成本高、消耗高等问题,因此研究一种成本合理且高效合成低聚半乳糖的新方法十分重要。本文旨在采用酵母表面展示技术将来自米曲霉Aspergillus oryzae CGMCC3.800的β-半乳糖苷酶基因（A.oryGal）展示表达在能够合成赤藓糖醇的解脂耶氏酵母Y.lipolytica CGMCC7326细胞表面,获得一株既能合成赤藓糖醇又能合成低聚半乳糖的新菌株Y.lipolytica CGMCC11369,并对该菌株进一步研究。通过分子生物学的方法,将强启动子FBA_IN、细胞壁锚定蛋白基因Pir1、β-半乳糖苷酶基因Gal分别克隆到pINA1311质粒中,将分别含有hp4d启动子和FBA_IN启动子的酵母表面展示表达盒转化解脂耶氏酵母,酶活检测获得具有较高酶活的酵母转化子H4和F1,酶活性分别为0.53±0.03 U/mg（干重细胞）和0.50±0.03 U/mg（干重细胞）,两种启动子对β-半乳糖苷酶的表达无明显区别,故选取H4转化子（A_T/A_H=3.7）作为本文研究对象。通过免疫荧光标记的方法确定A.oryGal表面展示在解脂耶氏酵母表面,酶学性质研究表明,该表面展示的β-半乳糖苷酶最适温度为60℃,高出游离β-半乳糖苷酶10²0℃,增加反应速率;最适pH为5.5,与固定化酶最适pH一致;新菌株Y.lipolytica CGMCC11369发酵合成赤藓糖醇后细胞可重复利用10次。工程菌株Y.lipolytica CGMCC 11369发酵葡萄糖生产赤藓糖醇后,收集菌体（约5 mg/mL干重细胞）全细胞转化,以500 g/L乳糖为底物,60℃,pH 5.5条件下,转化6 h,低聚半乳糖产量达160 g/L,转化率达51%,表面展示的β-半乳糖苷酶热稳定性和重复使用率更好,且成本较低,合理解决了目前低聚半乳糖生产中存在的问题。