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目的：（1）通过对高危难治恶性血液病患者异基因造血干细胞移植后输注DC-CIK细胞中CD4+CD25+CD127-T（Treg）细胞的检测及功能实验，探讨DC-CIK细胞输注物中不同比例的Treg细胞与恶性血液病患者移植后急性移植物抗宿主病（aGVHD）、复发及生存的关系。（2）通过检测异基因造血干细胞移植后患者外周血中Treg细胞的比例及Tim3在淋巴细胞亚群上的表达，探讨Treg细胞、Tim3与aGVHD发生的关系。方法：（1）采用流式细胞术检测高危难治恶性血液病患者在异基因造血干细胞移植后接受DC-CIK细胞治疗的输注物中Treg细胞百分比。（2）与同期行异基因造血干细胞移植但未接受DC-CIK细胞治疗的高危难治恶性血液病患者在aGVHD、复发及生存相比较。（3）采用流式细胞仪分选出DC-CIK细胞中的Treg细胞，运用混合淋巴细胞反应及MTT比色法，进行DC-CIK细胞中Treg细胞体外抑制功能实验。（4）采用流式细胞术检测异基因造血干细胞移植后发生aGVHD及未发生aGVHD患者外周血中Treg细胞的比例。（5）采用流式细胞术的方法检测异基因造血干细胞移植后发生aGVHD及未发生aGVHD患者外周血中Tim3在CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD3-CD56+细胞及CD4+CD25+T细胞上的表达。结果：（1）32例高危难治恶性血液病患者在异基因造血干细胞移植后接受DC-CIK细胞治疗，25例患者输注的DC-CIK细胞来源为供体，7例为异基因造血干细胞移植后受体。（2）Treg/DC-CIK细胞在5%以下的为低比例表达组，共10例；Treg/DC-CIK细胞在5%-10%之间的为中比例表达组，共16例；Treg/DC-CIK细胞在10%以上的为高比例表达组，共6例。（3）DC-CIK细胞中的Treg细胞与效应细胞的效靶比在1.3:1时抑制功能最强。（4）异基因造血干细胞移植后接受DC-CIK细胞治疗及未接受DC-CIK细胞治疗的高危难治恶性血液病患者从2010年12月随访至2013年7月1日，中位随访时间为13.7（2-19.7）个月。接受DC-CIK细胞治疗的4/32例（12.50%）患者发生I-II度aGVHD，其中3例为低比例表达组，1例为中比例表达组；未接受DC-CIK细胞治疗的10/27例（37.03%）患者发生aGVHD，其中7例发生I-II度aGVHD，3例发生III-IV度aGVHD，接受DC-CIK细胞治疗的患者的aGVHD的发生率及程度较未接受DC-CIK细胞的明显降低（P<0.05）；接受DC-CIK细胞治疗的患者中7/32例（21.88%）复发，1例为低比例表达组，3例为中比例表达组，2例为高比例表达组；未接受DC-CIK细胞治疗的患者中8/27例（29.63%）复发，两组患者间的复发率无明显的统计学差异（P>0.05）；接受DC-CIK细胞治疗及未接受DC-CIK细胞治疗的患者的2年总生存率(OS)分别为70.31%VS52.37%（P<0.05）,2年无病生存率（DFS）分别为64.52%VS53.84%（P<0.05）。（5）异基因造血干细胞移植后检测患者外周血中Treg细胞比例显示，aGVHD患者外周血中的Treg细胞较未发生aGVHD患者减低（P<0.05）。（6）Tim3在异基因造血干细胞移植后淋巴细胞亚群表达检测显示， Tim3在aGVHD患者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞及CD4+CD25+T细胞上的表达均较未发生aGVHD患者升高（P<0.05）；而Tim3在CD3-CD56+细胞上的表达，两组间无明显统计学差异（P>0.05）。结论：（1）DC-CIK细胞输注物中Treg细胞具有免疫抑制效应，异基因造血干细胞移植后输注DC-CIK细胞可以降低aGVHD的发生，却未明显影响移植物抗白血病（GVL）效应，从而有望提高高危难治白血病患者的治愈率，为造血干细胞移植后细胞生物干预治疗提供了一条新的途径。（2）Treg细胞在异基因造血干细胞移植后aGVHD的发生及进展中起负性调控作用，而负性调控因子Tim3在异基因造血干细胞移植后aGVHD的发生及发展中起促进作用，后续进一步研究可望为探讨aGVHD的发生、预防及治疗提供新的方向和策略。