整体柱具有渗透性好、制备简单、无需塞子制作等优点,从而避免了由塞子所引起的问题,已引起人们越来越多的关注,已在反相色谱、离子交换色谱、疏水作用色谱、亲和色谱、体积排阻色谱中获得了应用。 本文结合本研究室的工作,对有机聚合物整体柱的制备条件以及该柱对生物大分子的应用作一概述。 本文通过原位聚合制备了一种以甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)为单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)为交联剂的连续棒状色谱柱,并考察了单体、交联剂、制孔剂等条件对柱结构的影响,以此色谱柱为基质进行多方面的研究。 首先参照文献通过键合二乙胺的方法成功合成弱阴离子交换整体柱,通过优化色谱条件,对IL-18粗提液进行了分离,考察了不同条件对白介素-18在该色谱柱上分离效果的影响。 之后又通过键合三乙胺、二乙胺、乙二胺的方法制备出三种阴离子交换柱,考察了其色谱性能,并用键合乙二胺柱分离了蜗牛酶,用键合二乙胺柱分离了几种无机阴离子,取得了较好的效果。 在基质柱键合乙二胺后,继续用氯乙酸修饰,将其改性为弱阳离子交换柱,以此柱分离了木瓜蛋白酶;通过在线改性,将基质柱依次用乙二胺—氯乙酸—硫酸铜修饰,最终成为金属螯合整体柱,以此柱分离了超氧化物歧化酶;在基质柱做好后,用对氨基偶氮苯将其修饰为染料亲和柱,纯化了溶菌酶。