磁性复合物微球固定化脂肪酶制备手性高烯丙醇类化合物

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磁性聚合物微球具有磁响应性、生物相容性等特性,因而在生物医学、酶的固定化等领域应用广泛。为了获得单分散高磁性的聚合物微球,本文采用了分散聚合法制备出磁性复合物微球,利用磁性固定化脂肪酶和化学法两步一锅法合成手性高烯丙醇类化合物的方法。以偶氮二异丁腈(2,2-Azobis(2-methylpropionitrile,AIBN)为引发剂,以甲基丙烯酸缩水甘油酯(Glycidyl Methacrylate,GMA),苯乙烯(Styrene,St)为单体,以共沉淀法制备的壳聚糖(Chitosan,CS)修饰Fe304纳米粒子为磁源,不经分离加入单体相中,采用分散聚合法制备出了含有活性环氧基团的磁性聚合物微球MP(St-GMA)。通过扫描电子显微镜、透射电子显微镜、振动样品磁强计、X-射线粉末衍射、热失重分析和化学法表征可知MP(St-GMA)具有超顺磁性,饱和磁化强度为13.01emu/g。微球粒径约在0.8-1.4μm,功能性环氧基团含量为149.2μmol/g。采用化学法合成了(R,S)-1-(4-甲基苯基)-3-丁烯-1-醇,以MP(St-GMA)为载体,固定化假单胞菌脂肪酶(Pseudomonas sp Lipase,PSL)为催化剂,对外消旋体进行转酯化拆分。在反应温度40℃,乙酸乙烯酯(Vinyl Acetate,VA)为酰化试剂,VA与底物摩尔比为4:1,正庚烷为溶剂,PSL/MP(St-GMA)的中 PSL 与 MP(St-GMA)的质量比为 30mg(PSL)/100mg(载体),反应 9h 时底物(S)-1-(4-甲基苯基)-3-丁烯-1-醇的对映体过量值(enantiomeric excess,ees)达 99.3%,产物(R)-1-(4-甲基苯基)-3-丁烯-1-乙酸酯的对映体过量值eep为96.2%。固定化酶PSL/MP(St-GMA)在70℃下仍保持了良好的催化活性,4℃下储存60天其催化活性无明显变化,经7次重复后,(S)-1-(4-甲基苯基)-3-丁烯-1-醇的ees值为96.8%,(R)-1-(4-甲基苯基)-3-丁烯-1-乙酸酯的eep值为98.2%。.研究了化学酶一锅法制备苯环类及五元环类高烯丙醇单一对映体。以对氯苯甲醛为底物,合成(S)-1-(4-氯苯基)-3-丁烯-1-醇,确立了化学合成和酶法拆分反应兼容的溶剂为正庚烷,PSL/MP(St-GMA)催化反应进行,在反应温度40℃,反应12h时底物(S)-1-(4-氯苯基)-3-丁烯-1-醇的ees值达到99.7%,产物(R)-1-(4-氯苯基)-3-丁烯-1-乙酸酯的eep值达95.1%。实现了化学-酶法两步反应一锅进行的生产工艺,获得的醇和酯均具有较高的对映体过量值。化学酶一锅法制备技术应用于对甲基苯甲醛、对溴苯甲醛、对甲氧基苯甲醛和3,4-二甲氧基苯甲醛为反应物合成了相应的手性单一对映体并对其进行了核磁及旋光测定。所获得的底物ees值均高于99%。研究了 4-溴噻吩-2-甲醛、4-溴呋喃-2-甲醛、5-甲基呋喃-2-甲醛、5-氯噻吩-2-甲醛和5-溴噻吩-2-甲醛为底物,利用化学酶一锅法合成了相应的手性单一对映体并对其进行了核磁及旋光测定。所获得的底物ees值均高于99%。反映出PSL/MP(St-GMA)对这一系列的底物均表现出较好的催化活性和对映体选择性,实现了由手性醛为原料化学酶一锅法化合成光学纯高烯丙醇类化合物。.建立了一个环境友好、工艺简捷、产品纯度高的制备光学纯高烯丙醇类化合物的有效方法。
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