薯蓣皂素,又名薯蓣皂苷元,学名Δ5异螺旋甾烯-3-β-醇,属于异螺旋甾烯烷的衍生物。薯蓣皂素具有较高的药用价值,医药界称其为“药用黄金”,因此具有很好的经济效益,已经成为全世界研究的热点。但从薯蓣属植物中提取薯蓣皂素的方法对种质资源和环境造成了一定的破坏,这也制约了相关产业的发展。近年来,本实验室从盾叶薯蓣的根茎中分离纯化得到了一株能产生薯蓣皂素的内生菌——地衣芽孢杆菌SYt1,并且建立了从SYt1的发酵液中分离提取薯蓣皂素的方法体系。本论文研究了不同表面活性剂与氧载体对盾叶薯蓣内生地衣芽孢杆菌SYt1产薯蓣皂素的影响,进行了不同氧载体和表面活性剂的单因素试验,并从中挑选出试验结果较为理想的因子进行正交试验设计。根据正交试验结果进行分析,对最为理想的试验组进行验证,从而得到各因素的最佳添加剂量。本研究将为提高薯蓣皂素产量,实现微生物发酵法进行工业化生产薯蓣皂素提供实验依据和合理建议。(1)氧载体单因素分析在发酵初始阶段对正己烷、油酸、乙酸乙酯、豆油等4种氧载体的添加浓度进行单因素试验,分别选择各因素较为理想的浓度进行添加时间的确定。结果表明,乙酸乙酯对菌体生长有明显抑制作用;正己烷、油酸、豆油最适添加浓度分别为0.5%、2%、2%时,最佳添加时间均为发酵周期的第24h.(2)表面活性剂单因素分析在发酵初始阶段对二甲基亚砜(DMSO)、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、十二烷基硫酸钠(SDS)、聚乙二醇6000、吐温-80等5种表面活性剂的添加浓度进行单因素试验,分别选择各因素较为理想的浓度进行添加时间的确定。结果表明,DMSO、CTAB、SDS、聚乙二醇6000最适添加浓度分别为0.05g/L、0.1g/L、0.1g/L、0.2g/L时,最佳添加时间均为发酵周期的第72h;吐温-80最适添加浓度10mg/L时,最佳添加时间为发酵周期的第24h.(3)正交试验根据氧载体和表面活性剂的单因素试验结果与分析,分别选择表面活性剂SDS和吐温-80与氧载体正己烷和豆油的合适浓度范围,采用SPSS进行正交试验设计,并对结果进行单因素变量多因素方差分析及讨论。结果表明,有利于菌体生成的试验组合为:吐温-80 10mg/L,正己烷0.8%,豆油2%,SDSO.1g/L;有利于皂素生成的试验组合为:吐温-80 10mg/L,正己烷0.5%,豆油2%,SDS0.06g/L.对试验得到结果进行验证并分析,证实了正交试验的可靠性。本论文为盾叶薯蓣内生地衣芽孢杆菌SYt1发酵生产皂素的研究提供一定的参考依据。