论文部分内容阅读
目的：体外实验探究贝伐珠单抗的耐药机制,了解结直肠癌细胞的血管内皮生长因子受体和串珠素的变化，检测细胞培养液中的相关因子变化；同时探究串珠素干预对肿瘤细胞增殖的影响，评估串珠素干预对贝伐珠单抗耐药的影响。方法：MST方法检测肿瘤细胞的增殖；RT-PCR和Western blotting检测肿瘤细胞的血管生长因子受体和串珠素的mRNA和蛋白变化；ELISA和Western blotting方法检测细胞培养液中的相关因子蛋白变化。QRT-PCR（实时定量聚合酶链反应）和Western blotting检测串珠素小干扰RNA（siRNA）的效率；MST方法检测串珠素siRNA对肿瘤细胞增殖的影响。结果：贝伐珠单抗对肿瘤细胞增殖有轻微的抑制作用（p<0.05）；肿瘤细胞VEGFR1和VEGFR2出现了大幅度的上调；同时贝伐珠单抗诱导肿瘤细胞串珠素的上调表达。串珠素siRNA显著降低了肿瘤细胞的串珠素mRNA和蛋白表达水平（p<0.05）；串珠素siRNA对肿瘤细胞增殖有较强的抑制作用（p<0.05）；串珠素siRNA对贝伐珠单抗诱导的肿瘤细胞增殖有更强的抑制作用（p<0.05）。结论：贝伐珠单抗导致了肿瘤细胞血管内皮生长因子受体和串珠素的大幅度上调，这些因子的上调可能与贝伐珠单抗耐药机制密切相关，并限制着贝伐珠单抗治疗结直肠癌的临床疗效。因此，这些实验结果提示其它促血管生长因子或侵袭因子的上调可能与抗肿瘤血管新生治疗的耐药现象密切相关，这些因子可能成为解除抗血管新生治疗耐药的理想靶点。串珠素在肿瘤血管新手方面发挥着重要的作用，也和VEGF具有紧密的关系，因此串珠素靶点的干预或许成为临床上贝伐珠单抗耐药的潜在治疗手段，为肿瘤抗血管新生治疗的耐药提供一种治疗手段。