麻杏石甘汤抗甲Ⅰ型流感病毒FM1株的实验研究

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背景:流感是一种很常见的疾病,主要由流感病毒引起。流感会在全球范围内流行,并且没有明确的规律,往往造成很高的死亡率。由于抗原变异性和流行性的存在,流感病毒也被人们称为一种独特的病原体。流感是由流感病毒引起的一种古老的传染病,最早记录的流感是公元前430年发生在希腊的瘟疫。当新的流感病毒株出现的时候,往往会造成全国或全世界范围内的大暴发,这是流感病毒影响最深的地方。20世纪40年代,天然的灭活病毒疫苗出现并开始应用;60年代中期,金刚烷胺类衍生物作为抗流感病毒化学药物出现,这类药物对甲型有预防和治疗作用;90年代后期,又出现了神经氨酸酶抑制剂。尽管不断涌现出改良疫苗和新型抗病毒药物,但季节型流感病毒依然是一个极其重要的公共卫生问题。据统计,非流感暴发期间,美国平均每年有约2千万因流感而患呼吸系统疾病的病例,约4万人死亡。中药在流感的预防与治疗方面具有很大的优势,并且成为当前防治流感的重要研究方向。在此背景下,本研究对麻杏石甘汤进行了实验研究。一、目的:通过对麻杏石甘汤的实验研究,以初步探讨麻杏石甘汤抗呼吸道感染的作用机制,为麻杏石甘汤的临床应用提供实验依据。二、方法:(一)体外实验:以细胞存活率和抑制率为检测指标,采用MTT法检测麻杏石甘汤体外对甲型流感病毒活性的抑制效应;并通过其对甲1型流感病毒在MDCK细胞中增殖的影响来评价麻杏石甘汤体外对甲Ⅰ型流感病毒的作用效果。(二)体内实验:采用鼻腔感染流感病毒,小鼠感染流感病毒4小时后,分别灌胃给药(麻杏石甘汤高剂量组60g·kg-1中剂量组30g·kg-、低剂量组15g·kg-1利巴韦林组10g·kg-1),02mL/次/d,连续5d。通过观察麻杏石甘汤对流感病毒感染小鼠的死亡保护作用、肺指数的影响,从整体水平上考察麻杏石甘汤抗甲型流感病毒的作用效果。为进一步探讨麻杏石甘汤对甲型流感病毒治疗效果的机制,本实验又检测了麻杏石甘汤对甲型流感病毒感染小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响;针对感染流感病毒后机体的脾淋巴细胞增殖功能进行麻杏石甘汤的干预,初步探讨其对免疫功能的影响。三、结果:(一)体外实验:在最大无毒浓度范围内,麻杏石甘汤体外对甲Ⅰ型流感病毒的直接灭活作用不明显,与利巴韦林对照组相比差异显著(P<0.05);麻杏石甘汤对甲Ⅰ型流感病毒感染细胞的阻断作用和对已进入细胞的病毒抑制作用明显,与病毒对照组比较差异显著(P<0.05),与利巴韦林对照组相比差异不显著(P>0.05),且抗病毒效果与药物的浓度呈现剂量依赖关系。(二)体内试验:感染模型组的小鼠死亡率是80%,存活时间为8天;而高、中、低剂量组麻杏石甘汤的小鼠死亡率各是40%、50%和70%,存活分别为12天、11天和10天,与感染模型组相比有统计学意义(P<0.05),说明麻杏石甘汤可以降低流感病毒感染小鼠的死亡率,延长生存时间;模型组与正常组相比,小鼠的肺指数有所增加,肺组织也出现病毒性肺炎的改变;经过麻杏石甘汤的治疗后,小鼠肺指数明显下降(P均<0.05),与模型组比较病毒性肺炎的病变明显减轻,模型组肺组织大体病变呈实变,出血;麻杏石甘汤对流感病毒感染小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响:模型组0D值最低,与正常组比较(P<0.01),差异显著,说明病毒可以降低感染小鼠巨噬细胞吞噬功能;各药物组OD值较模型组均为高(P值均<0.01),差异极显著;模型组T、B淋巴细胞的增殖功能较正常组下降(P<0.01),麻杏石甘汤促进了T、B淋巴细胞的增殖,与模型组比较(P<0.01),差异显著;四、结论:以上结果说明麻杏石甘汤可以抑制流感病毒感染小鼠导致的肺部炎症,并能延长小鼠的存活时间,具有死亡保护作用;另外可以提高病毒感染后小鼠巨噬细胞的吞噬功能,起到调节免疫功能的作用。同时可以通过提高淋巴细胞增殖,改变流感病毒感染小鼠的免疫功能。
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