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目的:探讨重组人尿胰蛋白酶抑制剂(rhUTI)对实验性胰腺炎动物的保护作用及其可能的作用机制,为其申报国家一类新药与临床应用提供理论依据。方法:1.采用2%牛磺胆酸钠(0.1mL/100g,0.2mL/min)胰胆管逆行注射法制备急性胰腺炎大鼠模型。将实验大鼠随机分成6组:即对照组、模型(AP)组、rhUTI(1.75、3.5、7万U/kg)3个不同剂量组及阳性药乌司他丁(UTI,3.5万U/kg)组,每组10只。实验结束时,分别检测大鼠血清淀粉酶、尿液淀粉酶、血常规、肾功能、电解质以及胰腺病理组织学损伤的变化。2.采用2.5%牛磺胆酸钠(1ml/kg)胰胆管逆行注射法制备急性胰腺炎犬模型。将实验犬随机分成6组:即对照组、模型(AP)组、rhUTI(0.75、1.5、3万U/kg)3个不同剂量组及阳性药乌司他丁(UTI,1.5万U/kg)组,每组6只。实验结束时,分别检测犬血清淀粉酶、尿液淀粉酶、血常规、肾功能、电解质以及胰腺病理组织学损伤的变化。3.采用TUNEL法检测急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞凋亡情况;采用免疫组化染色法分别观察急性胰腺炎大鼠胰腺组织中Fas、Fas-L和Caspase-3蛋白表达的变化;采用RT-PCR法分别检测急性胰腺炎大鼠胰腺组织中Fas、Fas-L和Caspase-3mRNA表达的变化。结果:1.经胰胆管逆行注射2%牛磺胆酸钠成功制备急性胰腺炎大鼠模型,与对照组比较,AP组大鼠的血清淀粉酶、尿液淀粉酶,红细胞计数,尿素氮、肌酐升高,血清Ca2+降低,胰腺组织充血水肿、灶性坏死并伴有大量炎性细胞浸润。与AP组比较,UTI(3.5万U/kg)及rhUTI(3.5、7万U/kg)对升高的血清淀粉酶、尿液淀粉酶有降低作用,UTI和rhUTI各剂量组胰腺组织充血水肿减轻、坏死灶减小,炎性细胞浸润减轻,但UTI和rhUTI各剂量对急性胰腺炎大鼠血常规、肾功能和电解质变化均未见明显影响。2.经胰胆管逆行注射2.5%牛磺胆酸钠成功制备急性胰腺炎犬模型,与对照组比较,AP组犬血清淀粉酶于造模后24h、28h和32h升高,且32h达到高峰,尿液淀粉酶于造模后32h升高,胰腺组织充血水肿、灶性坏死并伴有大量炎性细胞浸润,血清K+和Ca2+分别于造模后24h、8h降低,血常规、肾功能均未见明显变化。与AP组比较,UTI和rhUTI各剂量于造模后28h、32h对升高的血清淀粉酶有降低作用,rhUTI(1.5、3万U/kg)和UTI(1.5万U/kg)对升高的尿液淀粉酶有降低作用,胰腺病理组织学检测结果表明:UTI和rhUTI各剂量组胰腺组织充血水肿减轻、坏死灶减小,炎性细胞浸润减轻。3. TUNEL法检测结果显示,正常组大鼠胰腺腺泡细胞凋亡极少,急性胰腺炎时腺泡细胞凋亡指数升高,病变程度较重的模型组凋亡细胞少见,与AP组比较,UTI及rhUTI各剂量组凋亡细胞明显增多。免疫组化及RT-PCR结果显示,在正常组大鼠胰腺组织中即有Fas、Fas-L和Caspase-3蛋白及mRNA的弱阳性表达,与对照组比较, AP组大鼠胰腺组织中Fas、Fas-L和Caspase-3的蛋白及mRNA表达水平均降低;与AP组比较,UTI和rhUTI各剂量组大鼠胰腺组织中Fas、Fas-L和Caspase-3的蛋白及mRNA表达水平明显升高,且Caspase - 3表达水平在各个组间的变化趋势与Fas/Fas-L系统的变化趋势相一致。结论: rhUTI对急性胰腺炎大鼠和犬有一定的保护作用,可抑制淀粉酶活性,改善胰腺组织的病理性损伤,其作用机制可能与促进胰腺腺泡细胞凋亡,上调胰腺组织中Fas、Fas-L和Caspase-3蛋白及mRNA表达有关。