【摘 要】
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本研究分离猪(杜长大三元杂)外周血单个核细胞(PBMC)进行体外培养，经LPS或ConA诱导培养48h后，提取培养细胞总RNA，应用RT-PCR扩增猪IL-6基因，并克隆到pMD18-T载体后测序。
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本研究分离猪(杜长大三元杂)外周血单个核细胞(PBMC)进行体外培养，经LPS或ConA诱导培养48h后，提取培养细胞总RNA，应用RT-PCR扩增猪IL-6基因，并克隆到pMD18-T载体后测序。
获得的猪IL-6全基因ORF的氨基酸序列与人和其它动物的IL-6全基因ORF的氨基酸序列进行了同源性比较及其进化树的绘制，IL-6基因具有种的多样性，不同种动物的IL6基因亲缘关系越近，进化关系也越近，核苷酸序列的改变相应会引起氨基酸序列的改变。
本研究又在成功克隆猪IL-6基因的基础上运用DNA重组技术，将猪IL-6基因ORF片段重组入非融合原核表达质粒pBV220中的适当位置，成功获得非融合原核表达质粒pBVpIL-6。表达的蛋白主要以包含体形式存在，包含体经过变性溶解和复性后用酶联免疫吸附试验(ELISA)做定性定量检测。ELISA结果证实了所表达出的蛋白为猪IL-6，复性后具有一定活性，并测出了复性后活性蛋白的浓度。本研究成功获得猪IL-6基因并表达出该蛋白，为新型免疫增强剂的研制、开发与应用奠定了基础。
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