罗汉果甜苷提取物延缓自然衰老小鼠卵巢功能衰退的作用研究

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卵巢是雌性动物的重要生殖器官,其功能好坏决定生殖力。老龄导致的卵巢功能衰退是不可逆的自然生理过程,主要表现为卵泡储备耗竭和卵母细胞质量下降。罗汉果主要分布在我国南方亚热带地区,是广西特色经济作物,具有药食兼用性,其主要活性成分罗汉果甜苷能抗炎、抗氧化、降血糖、降血脂等。最近本课题组还报道了罗汉果甜苷具有促进卵母细胞成熟及缓解各种应激对卵母细胞损伤的作用。基于上述事实,我们推测罗汉果甜苷提取物(Mogroside-rich extract,MGE)能缓解老龄导致的卵巢功能衰退。在本研究中,我们以小鼠为研究对象,探究MGE对老龄小鼠卵巢功能衰退的延缓作用,并初步探讨其作用机理。主要研究内容及结果如下:1.MGE具有缓解老龄小鼠卵巢功能衰退的作用为了探究MGE对老龄小鼠卵巢功能衰退的延缓作用,设立青年组(10周龄)、老龄组(10至44周龄正常饮水)和MGE处理组(10至44周龄饮水中添加600 mg/kg/day MGE)。结果显示MGE处理组与老龄组相比,葡萄糖耐受性和胰岛素敏感性显著增加(P<0.05和P<0.01),说明MGE可缓解老龄导致的机体代谢异常。监测小鼠动情周期变化发现MGE处理可改善老龄小鼠动情周期紊乱。另外,较老龄组相比MGE处理组小鼠卵巢卵泡储备显著增加(P<0.01),卵巢纤维化显著下降、抗氧化水平显著提高(P值均<0.05)。此外,我们发现MGE处理小鼠的排卵数量显著高于老龄组(P<0.0001),且细胞形态得到改善。MGE还能够促进老龄小鼠卵母细胞的体外成熟和早期胚胎发育,主要表现为卵母细胞极体排出率、二细胞率、囊胚率和囊胚细胞数的显著提高(P值分别<0.0001、0.05、0.05和0.05)。以上结果说明MGE能缓解老龄小鼠卵巢功能衰退。2.MGE能够改善老龄小鼠卵巢炎症微环境为了探讨MGE延缓老龄小鼠卵巢功能衰退的分子机理,对三组卵巢组织进行转录组测序分析。差异表达基因(DEGs)分析显示,与老龄组相比青年组和MGE处理组之间共鉴定出1160个共有上调DEGs和1096个共有下调DEGs。GO分析表明MGE促进性腺发育、卵泡发育、性激素分泌;抑制肿瘤坏死因子产生、白细胞-细胞粘附和T细胞活化。KEGG分析表明上调DEGs在细胞周期、孕酮介导的卵母细胞成熟、TGF-β信号通路富集;下调DEGs富集于吞噬体、细胞粘附分子、抗原加工呈递、NF-κB信号通路。鉴于下调KEGG通路均与炎症反应相关,我们筛选炎症相关基因(Tnfα、Il6ra、Il10rb、Il2、Tgfb1和Lc3)进行q RT-PCR验证,结果一致证实MGE显著下调这些基因在老龄小鼠卵巢的表达(P值分别<0.05、0.01、0.01、0.05、0.05和0.001)。此外,与老龄组相比MGE处理显著降低了卵巢TNF-α水平(P<0.05)。以上结果说明MGE可能通过改善卵巢炎症微环境延缓老龄小鼠卵巢功能衰退。综上所述,本研究发现MGE对老龄小鼠卵巢功能衰退具有延缓作用,这可能与卵巢炎症微环境改善有关。本研究结果为MGE抗卵巢衰老提供参考依据,为其在生殖医学和畜牧生产中的应用奠定基础。
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