香草酸的结构修饰及其衍生物药理活性研究

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滇桂艾纳香是传统的中草药,对于治疗妇科疾病有显著疗效,香草酸为其有效成分之一。本文以香草酸为原料,与磺胺作用,合成了21个结构新颖的酰胺衍生物,并通过红外、核磁和质谱确定了结构。通过凝血活性实验,发现产物在较低浓度下(c=0.06 mg·mL-1和c=0.12 mg·mL-1)的凝血四项数据无统计学意义,在c=0.24 mg·mL-1时有几种产物的TT(凝血酶时间)值有显著性差异。其中Zxp-2及Zxp-7有一定的促凝作用,具有凝血活性;Zxp-4显示出一定的抗凝活性;Zxp-10和Zxp-16的TT值相比空白组来说变化最明显,但没有显著性差异。离体子宫实验是发现妇科新药一种常用途径,通过实验发现部分产物在给药前后的对子宫收缩的频率和张力平均抑制率都没有显著性差异,无统计学意义,只有13种衍生物的数据具有统计学意义且变化率超过10%。所有产物对小鼠离体子宫收缩频率和平均张力在一定程度上都有抑制或促进作用,其中Zxp-1对离体子宫收缩的平均张力抑制作用最强,平均抑制率为-17.56%,Zxp-5对离体子宫收缩频率抑制作用最强,平均抑制率为-17.14%,Zxp-15对子宫的收缩频率和平均张力均有较为明显的抑制作用,抑制率分别为-14.78%和-11.15%,这些都可以作为寻找治疗痛经药物的参考。Zxp-21对小鼠离体子宫平均张力和频率促进作用最强,平均抑制率分别为+14.72%和+11.67%,这将利于产后子宫恢复,预防产后大出血,在合成治疗功血药物方面有一定的启示作用。从产物的抑菌活性实验来看,有7种产物有一定的抑菌效果,其中Zxp-2的抑菌效果较好,其对痢疾杆菌及金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为0.625,2.5 mg·mL-1,其次是Zxp-17,对鸡白痢沙门氏菌的(MIC)为 1.25 mg·mL-1,其余的MIC都在5-10 mg·mL-1 之间。在模拟生理条件下应用荧光猝灭法研究了 19种产物与BSA之间的相互作用机制。结果表明产物与BSA之间存在相互作用,所有产物荧光猝灭过程均以静态猝灭为主。除Zxp-16外的所有产物均与BSA只有一个结合位点,可与BSA形成1:1的复合物。大部分的药物结合常数Ka值都在104数量级以上,说明与BSA的结合能力较强,可以在体内被蛋白质储存、分配、代谢和运输。其中结合能力最强的是Zxp-16,Ka=1.24×107 L·mol-1(301K),结合位数n=1.51,有可能与BSA形成1:2的复合物;结合能力最弱的是Zxp-2,Ka=9.00×102 L·mol-1(301K)。所有产物与BSA的结合反应都是自发的,而且是通过非辐射能量转移来形成的,相互之间的作用力主要以疏水作用力、范德华力和氢键为主,只有Zxp5-BSA是以静电作用相结合。通过对BSA的同步荧光研究发现产物与BSA的结合位点更接近于色氨酸残基,且多数产物都没有使BSA的构象发生改变,只有Zxp-7、Zxp-9、Zxp-15、Zxp-16、Zxp-17、Zxp-18和Zxp-19在AX=15 nm或△λ=60 nm时有红移或蓝移现象,表明BSA中的荧光发射基团周围环境发生了变化,环境极性改变,从而改变了 BSA的构象。
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