低氧对人肺腺癌A549细胞球上皮—间质转化促转移影响

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肺癌是我国最常见的恶性肿瘤之一。其恶性程度高,转移发生早,对放化疗敏感性较差,死亡率居高不下,其中转移是肺癌患者死亡的主要原因之一。近年来提出的肿瘤干细胞(cancer stem cells, CSC)学说及其的研究进展,为人们认识肿瘤的发生、发展、转移及复发提供了一个全新的视野。根据肿瘤干细胞在肿瘤转移过程中所起的决定作用,有学者进一步提出了转移肿瘤干细胞(migrating cancer stem cells,MCSC)的概念。在绝大多数实体瘤内存在低氧微环境,已有研究报道低氧对肿瘤转移起促进作用;然而,目前对于CSC在低氧环境下转移能力相关特征,尚缺乏相关的研究。本实验旨在观察在低氧微环境因素刺激下对具有干细胞特性的A549细胞球通过上皮-间质细胞转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)机制促进肺癌转移的影响。目的:探讨低氧对人肺腺癌A549细胞来源A549细胞球EMT促进肺癌转移机制的影响。方法:采用肿瘤干细胞无血清培养基(serum-free medium,SFM)的方法培养A549细胞,诱导A549细胞球体形成;随后将A549细胞和A549细胞球体在低氧环境下培养24h,分别检测2种细胞中EMT标志物上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达水平,并与它们在常氧条件下的表达情况进行比较。结果:在常氧和低氧条件下,A549细胞球体中E-cadherin免疫荧光、mRNA和蛋白的表达水平均较A549细胞降低,而Vimentin的表达水平升高;与常氧条件相比,低氧培养的A549细胞及A549细胞球体中E-cadherin免疫荧光、mRNA和蛋白的表达水平均下调,且以A549细胞球体下调更为明显,而Vimentin的表达水平则升高。结论:A549细胞球体比A549细胞具有更强的转移能力,低氧条件下A549细胞球体比常氧条件下的A549细胞球体具有更强的转移能力。
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