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目的探讨临床分离碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(Carbapenem-resistant Klebsiella pneumonia,CRKP)Ⅰ类整合子及插入序列共同区(Insertion sequence common region,ISCR)分布情况和耐药基因盒类型,分析我院CRKP耐药机制与分子流行病学特征。方法运用Vitek 2 compact全自动微生物分析仪对临床分离的44株CRKP进行鉴定和药敏试验,以改良Hodge试验检测碳青霉烯酶,以乙二胺四乙酸(Ethylenediaminetetraacetic acid,EDTA)协同法分析金属β-内酰胺酶,运用聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)方法鉴定细菌携带的耐药基因;以肠杆菌基因间重复性共有序列(Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus,ERIC)PCR和多位点序列(multilocus sequence typing,MLST)分型技术分析耐药菌株同源性。以PCR技术检测CRKP中整合酶基因IntⅠ/Ⅱ/Ⅲ、Ⅰ类整合子可变区、ISCR1、ISCR1可变区及Ⅰ类整合子与ISCR1关系,并对可变区进行测序分析。结果临床44位CRKP感染者的平均年龄(65.3±25.6岁),且伴有基础疾病如糖尿病、高血压和颅脑外伤。44株CRKP中痰液标本的占70.4%,分离自ICU和神经外科的CRKP居多,其构成比分别为22.7%(10/44)、29.5%(13/44)。分别有88.6%(39/44)和47.7%(21/44)的患者使用过β-内酰胺酶类和碳青霉烯类药物。体外药敏实验显示所有菌株对培南类药物耐药,95.0%以上菌株对头孢类药物耐药。所有菌株均检出KPC-2基因,未检出NDM-1、SME、IMP、OXA-48、VIM和GES基因;40株携带CTX-M-9基因,36株携带TEM基因,10株携带SHV基因。通过ERIC-PCR将菌株分为13型,Ⅰ型为主要流行型(38.6%,17/44);MLST分型结果,CRKP被分为10个ST型,其中以ST11型为主(59.1%,26/44)。44株CRKP中Ⅰ类整合酶基因阳性32株,阳性率为72.7%,其中29株检出可变区结构,阳性率65.9%,序列分析为耐药基因盒aad A,未检出Ⅱ/Ⅲ类整合酶基因。ISCR1阳性6株,1株检出ISCR1可变区,序列分析为耐药基因盒sul1。1株CRKP中的ISCR1直接与Ⅰ类整合子3’保守区下游串联。结论(1)临床分离44株CRKP均为产KPC-2酶菌株,且携带其它耐药基因。(2)我院CRKP同源性较高,可能与分子克隆有关,临床应高度重视并采取有效措施阻止其传播。(3)Ⅰ类整合子广泛分布于CRKP中并携带add A耐药基因盒;ISCR1分布较少,携带sul1耐药基因盒;Ⅰ类整合子和ISCR1可以以串联形式存在于CRKP中,可能介导了耐药基因在不同CRKP克隆株间的水平传播,导致CRKP耐药性呈现复杂化和多样化。