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目的:研究阿司匹林(aspirin,ASP)对人结肠癌细胞株SW480生物学行为的影响,初步探讨阿司匹林通过LIMKl/Cofilin通路抑制SW480细胞迁移与侵袭活动的分子机制。方法:课题组进行了 CCK-8实验检测阿司匹林对人结肠癌细胞株SW480生长和增殖的影响;通过划痕实验检测阿司匹林对细胞迁移能力的影响;Transwell侵袭实验检测阿司匹林对SW480细胞的侵袭能力的影响;蛋白印迹实验(Western blot)及免疫荧光实验发现阿司匹林处理SW480细胞后LIMK1/Cofilin通路信号分子的表达;激光共聚焦扫描显微镜观察阿司匹林对SW480细胞形态和细胞骨架超微结构的影响。结果:1.阿司匹林可抑制人结肠癌细胞株SW480的增殖CCK-8实验结果显示,阿司匹林2.5mM、5mM、10mM、15mM浓度处理结肠癌SW480细胞24小时的细胞抑制率分别为29.2%、39.2%、49.4%、53.8%,处理48小时的细胞抑制率分别为:32.1%、46.1%、62.8%、66.8%,较对照组有显著性差异(P<0.05)。2.阿司匹林可抑制人结肠癌细胞株SW480迁移与侵袭划痕实验及Transwell侵袭实验结果提示,5mM的阿司匹林干预结肠癌SW480细胞24小时与48小时后,ASP实验组较对照组迁移距离明显降低,穿膜细胞数明显减少(P<0.05)。3.阿司匹林对结肠癌细胞SW480中LIMK1、P-LIMK1、Cofilin、P-Cofilin蛋白表达的影响Western blot实验结果表明经过阿司匹林处理后LIMK1、Cofilin蛋白的表达变化情况无统计学意义(P>0.05)。但是阿司匹林组的P-LIMK1蛋白的表达较对照组呈时间依赖性抑制(P<0.05),阿司匹林组的P-Cofilin蛋白的表达水平较对照组升高(P<0.05)。免疫荧光半定量实验见阿司匹林组的P-LIMK1平均光密度值明显低于对照组(P<0.05)。4.阿司匹林可引起SW480细胞形态及骨架变化使用激光共聚焦显微镜观察见空白对照组中结肠癌SW480细胞的骨架微丝主要分布于细胞膜和细胞质,并相互连接成网状,按细胞极性呈束状分布。质膜边缘凹凸不平,上面分布着丰富细长的纤毛和伪足,细胞呈现出圆形或椭圆形态,此时细胞具有较强的侵袭性和转移能力。随着5mM阿司匹林处理的时间增长,纤毛伪足收缩或消失,细胞骨架微丝分布紊乱,局部出现溶解或断裂现象,细胞呈现不规则形态。结论:1.阿司匹林可抑制体人结肠癌细胞株SW480的生长增殖,并且该抑制呈时间-剂量依赖型;2.阿司匹林能对人结肠癌细胞株SW480的迁移与侵袭等生物学行为产生有效抑制;3.阿司匹林可通过LIMK1/Cofilin信号通路影响结肠癌细胞株SW480的侵袭及迁移,阿司匹林可能导致LIMK1蛋白的磷酸化受阻而产生连锁反应,特别是P-Cofilin表达水平的升高,引起细胞骨架F-actin与G-actin聚合与解聚失调,从而导致细胞形态及骨架变化,最终抑制细胞迁移与侵袭能力。