据报道,西方国家犬超重和肥胖的比例在19.7-59.3%;我国犬肥胖症比例在35-40%。目前,犬肥胖症的发病率不断呈现上升趋势,肥胖问题已成为小动物临床的一项重大挑战。肥胖症不仅会引起宠物犬多种器官的功能障碍,降低其的寿命,还会引起其他疾病发病率的增高,如心血管系统疾病、骨关节疾病、泌尿生殖疾病、皮肤病、肿瘤等,对犬机体免疫机能、生活质量等也造成严重肺负面影响,还可增加外科手术麻醉风险。犬肥胖症也成为宠物行业十分关注的热点。为了解重庆市犬肥胖症的发生状况,2018年6月至2018年12月,收集了重庆渝北区、永川、荣昌周边9家宠物医院前来就诊的209只犬的信息。信息包括犬只品种、年龄、性别、是否绝育或去势、饲养环境、每日餐数、日粮成分、运动情况(运动时间和类型)等。通过九级体况评分系统评定犬只是否肥胖,分析调查犬群肥胖症发生与4种动物性因素、5种饲养性因素、5种管理性因素的关系。为探头肥胖症犬血脂代谢相关血液学指标及主要代谢器官肝脏的变化,试验选取了12只2~3岁健康中华田园犬随机分为对照组和试验组,6只/组。对照组犬饲喂基础日粮,试验组饲喂高脂日粮(日粮总≥23%),试验周期150天。采取计重、测定皮脂厚度、体况评分、超声检查肝细胞脂肪变性状况,检测血脂代谢相关指标(血清甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、载脂蛋白APO-AⅠ及APO-B、胰岛素),肝脏样品进行石蜡组织切片、染色观察等方法,初步探讨了肥胖症犬血脂代谢相关血液指标变化差异、肝脏组织变化情况。基于ABSciexQTRAPLC-MS/MS检测平台,利用广泛靶向代谢组技术,检测了对照组犬、肥胖症模型犬血浆氨基酸及其衍生物、核酸及其衍生物、有机酸、碳水化合物、脂质、胆汁酸、维生素等代谢组分,分析肥胖症犬与对照犬代谢组分差异及差异性代谢物的作用途径。利用RT-qPCR技术研究两组犬肝脏中VLDLR、PPARαmRNA表达水平,以初步揭示了犬肥胖症发生的分子机制。获得了如下结果:1.重庆部分地区宠物犬肥胖症的流行病学调查:本试验调查了重庆三个城区2018年6~12月间9家宠物医院就符合要求的诊犬209只,通过动物体况九级评分法对调查犬体况进行评分,结果犬肥胖症的发生率为28.71%。其中,绝育犬的发病率高于未绝育犬(p<0.05),调查的5种饲养因素(进口控制、每日喂食次数、犬粮种类、零食使用、所属犬群)对犬肥胖症的发生率有显著影响(p<0.05),5种管理因素(饲养数量、饲养环境、饲养方式、户外活动、运动方式)也与犬肥胖症的发生率有显著影响(p<0.05)。2.犬肥胖症模型的建立:试验采用总脂含量≥23%的高脂日粮饲喂犬只,150天的试验结束时,肋骨突出情况评估达到“++”;超声检测犬皮下脂肪厚度,高脂组犬腰中部皮脂厚度、腹部皮脂厚度均显著大于对照组犬(p<0.05);高脂组犬平均体质量、血清TG、TC、LDL-c浓度均显著高于对照组犬(p<0.05),说明犬肥胖症模型建立成功。3.肥胖症模型犬血脂代谢及肝脏变化:对肥胖症模型犬血浆载脂蛋白、胰岛素检测和分析,结果表明肥胖症血浆APO-AⅠ浓度显著低于对照组犬(p<0.05),说明当犬血浆APO-AⅠ浓度下降时,血脂转运障碍,可导致血脂水平升高,诱导肥胖症的发生;肥胖症犬胰岛素水平高于对照组,说明肥胖症犬存在胰岛素抵抗现象。肝脏超声探测显示,肥胖症犬肝区近场回声增强、远场回声减弱,被膜边缘线条稍有模糊;肝实质弥漫密集点状回声,有小团块状回声密集影,肝内管道模糊。肝组织切片观察,肥胖症犬肝细胞索排列紊乱,肝细胞弥漫性脂肪变性,肝细胞胞浆内有大小不等的脂滴出现,说明肥胖症犬出现了肝脂肪变性(即脂肪肝)。4.肥胖症犬代谢组学研究结果显示,与对照健康犬比较,肥胖症模型犬血浆中猪去氧胆酸、3-羟基丁酸、丙二酸3种代谢物显著性上调,雌酮、刺芒柄花素、2-次醇、L-胱氨酸、L-蛋氨酸、L-胱硫醚、N-甘氨酸-L-亮氨酸7代谢物显著性下调。代谢途径分析,肥胖症模型犬的差异性代谢物可通过半胱氨酸和蛋氨酸的代谢途径、CAMP信号通路、脂肪酸的合成途径及神经活性配体—受体相互作用途径发挥作用。5.肥胖症犬肝脏脂质代谢关键基因表达研究:分别采集肥胖症模型犬和对照组犬肝组织,提取肝脏总RNA,利用RT-qPCR法研究两组犬肝脏中VLDLR、PPARαmRNA表达水平,结果显示,肥胖症模型犬肝脏VLDLR、PPARα在mRNA水平表达下调。