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目的：利用小鼠脾细胞探求高糖环境下宿主细胞免疫功能的变化情况。方法：1、无菌条件下分离小鼠（C57BL/6）脾细胞，调整细胞浓度为3×106/ml，培养于含5%胎牛血清（FBS）、2mmol/L谷氨酰胺、100u/ml青霉素、0.1mg/ml链霉素及25mmol/LHEPES的RPMI1640培养基中，同时加入LPS（1μg/ml）及ConA（5μg/ml）为刺激T、B淋巴细胞增殖，然后置于37℃、5%CO2培养箱中孵育。2、实验分为3组：5.5mmol/L糖浓度组、11.1mmol/L糖浓度组和25mmol/L糖浓度组，分别于培养6h、24h和48h时，用CytoTox96非放射性细胞毒性检测方法检测不同浓度高糖对小鼠脾细胞的毒性作用；用酶联免疫吸附法（Enzyme-linkedImmunosorbentAssay，ELISA）检测培养细胞上清中肿瘤坏死因子-α（TumorNecrosisFactor–α，TNF-α）、干扰素-γ（Interferon-γ，IFN-γ）、白介素-6（Interleukin-6，IL-6）及白介素-10（Interleukin-10，IL-10）的浓度；用流式细胞术检测小鼠脾细胞内分泌TNF-α的情况。3、数据均用均数±标准差（）表示，用SPSS16.0统计分析软件进行统计学分析。各组均数的比较行单因素方差分析（ANOVA），用最小显著差法（1eastsignificantdifference，LSD）作两两比较，若不满足方差齐性则用Dunnett’s检验，P<0.05为差异有统计学意义。结果：1、CytoTox96非放射性细胞毒性检测结果：与正常糖浓度（5.5mmol/L）组相比，高糖对小鼠脾细胞没有明显的毒性作用。2、ELISA法检测培养6h、24h、48h上清中细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-6及IL-10的浓度，结果显示：随着糖浓度的升高，四种细胞因子的浓度逐渐降低，并呈现明显的剂量-效应关系，且差异具有统计学意义（P<0.05）。3、流式细胞术检测24h高糖刺激下小鼠脾细胞胞内分泌TNF-α的情况：结果表明CD3+T细胞是小鼠脾细胞分泌TNF-α的主要细胞来源。在25mmol/L糖浓度刺激下，CD3+T细胞亚群内TNF-α阳性细胞的百分比显著均低于5.5mmol/L糖浓度组和11.1mmol/L糖浓度组（P<0.05）。结论：高糖环境下，脾细胞在刺激物作用下分泌TNF-α、IFN-γ、IL-6及IL-10等细胞因子的能力减弱，提示糖尿病患者更易感染可能与细胞免疫功能降低有关。