【摘 要】
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花期调控决定着植物能否正确的完成成花转变,直接影响着后代的遗传质量,因此人们一直在研究和完善花期调控网络。成花转变和花发育离不开细胞的分裂和分化,所以研究细胞周期
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花期调控决定着植物能否正确的完成成花转变,直接影响着后代的遗传质量,因此人们一直在研究和完善花期调控网络。成花转变和花发育离不开细胞的分裂和分化,所以研究细胞周期在花期调控中的作用有助于完善花期调控途径。本课题通过分析一个晚花烟草材料转录组数据,发现细胞周期类基因有差异表达,通过进一步深入研究,探索细胞周期类基因对于开花时间的影响,摸索细胞周期在花期调控中的作用。本研究以Rr MYB7晚花烟草和一些花期关键基因的超表植株和突变体植株为材料,通过做表达分析探索细胞周期基因与花期调控之间的关系。主要结果如下:1.利用已有超量表达Rr MYB7转基因烟草自交种子,筛选出生长发育滞后,植株矮小,较野生型开花晚,叶片卷曲的转基因株系。同时将Rr MYB7基因超量表达载体转化拟南芥后,发现类似表型。2.Rr MYB7转基因烟草培养10 d,发现转基因幼苗主根长度较野生型明显变短。3.分析Rr MYB7转基因烟草转录组序列,发现细胞周期类基因有差异表达,荧光定量PCR证实细胞周期类基因有强烈下调,说明Rr MYB7类基因影响了细胞周期的表达。4.构建4个花期基因的超表载体p CAMBIA2300s-At FT、p CAMBIA2300s-At FD、p CAMBIA2300s-At AP1、p CAMBIA2300s-At FT+At FD分别转化拟南芥,均获得了阳性植株,其中p CAMBIA2300s-At FT、p CAMBIA2300s-At AP1转基因拟南芥有早花表型,且At AP1的超量表达植株花器官萼片化,不能形成正常的花器官,后期偶尔有花可以结实少量种子。纯化1个拟南芥早花突变体tfl1-11和4个晚花突变体ft-1、fd-1、soc1-1、lfy-1。5.做花期基因材料的细胞周期类基因表达分析,材料包括ft-1、fd-1、lfy-1、tfl1-114个拟南芥突变体和At FT超表植株。只有突变体lfy-1中Cyc A2;1、Cyc D3;1和Cyc D3;3有明显下调,说明LFY影响着细胞周期类基因的表达。
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