【摘 要】
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碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是公认的光感受器存活因子,能够治疗视网膜变性.该研究选择bFGF作为目的基因,构建了原核表达载体,用SDS-PAGE和Western-bloting证实原核表达成
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碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是公认的光感受器存活因子,能够治疗视网膜变性.该研究选择bFGF作为目的基因,构建了原核表达载体,用SDS-PAGE和Western-bloting证实原核表达成功.又以绿色荧光蛋白(GFP)作为标记基因,构建了bFGF和GFP的真核表达载体pcFG,首先转染了BHK细胞,真核表达成功.然后,转染人RPE细胞,经G418筛选,通过荧光显微镜、免疫细胞化学以及原位杂交证实bFGF和GFP在RPE细胞中获得了稳定、持续的表达,从而成功制备了基因工程化的RPE细胞.MTT、流式细胞仪和透射电镜检测后,证明bFGF基因转移促进RPE细胞增殖.说明bFGF基因对RPE细胞的转染、筛选以及利用RPE细胞作为靶细胞等一系列步骤是可行的,这为进一步应用基因工程化RPE细胞移植治疗视网膜色素变性奠定了基础.
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