【摘 要】
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背景:慢性萎缩性胃炎（Chronic atrophic gastritis,CAG）是一种常见消化系统疾病,以黏膜上皮和腺体萎缩、黏膜变薄为特征,可伴有肠上皮化生、不典型增生。慢性萎缩性胃炎与胃癌发生密切相关,被公认为是胃癌的癌前病变。在多年的临床应用中加味黄连汤是治疗慢性萎缩性胃炎的有效方剂,该方治疗慢性萎缩性胃炎机制尚不明确,深入探讨其作用机制为临床应用提供科学依据。目的:利用SD（Sprag
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背景:慢性萎缩性胃炎（Chronic atrophic gastritis,CAG）是一种常见消化系统疾病,以黏膜上皮和腺体萎缩、黏膜变薄为特征,可伴有肠上皮化生、不典型增生。慢性萎缩性胃炎与胃癌发生密切相关,被公认为是胃癌的癌前病变。在多年的临床应用中加味黄连汤是治疗慢性萎缩性胃炎的有效方剂,该方治疗慢性萎缩性胃炎机制尚不明确,深入探讨其作用机制为临床应用提供科学依据。目的:利用SD（Sprague Dawley）大鼠复制慢性萎缩性胃炎模型,研究加味黄连汤对慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜结构的影响;通过实时定量PCR（quantitativereal-time-PCR,qPCR）检测加味黄连汤对慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜白介素 1β（Interleukin,IL-1β）、分泌型免疫球蛋白 A（Secretory Immunoglobulin A,SIgA）表达的影响;采用16S核糖体RNA基因测序分析法（16S rDNA）测序检测研究加味黄连汤对慢性萎缩性胃炎大鼠的胃肠道菌群影响。方法:取30只SD大鼠,体重150±20g,以随机数字表法,随机分为3组:正常对照组（NC）、慢性萎缩性胃炎模型组（CAG组）、加味黄连汤组（MHLD组）。CAG组和MHLD组以0.1%氨水溶液及20mmol/L脱氧胆酸钠溶液每日交替,配合饥饿失常法复制慢性萎缩性胃炎大鼠模型,造模10周,造模成功后MHLD组予加味黄连汤灌胃2周（13.65g/KG/d）,NC组与CAG组予以等剂量的生理盐水灌胃（1ml/100g/d）。干预结束后,收集大鼠胃粘膜组织及粪便,采用16S rDNA测序检测胃肠道菌群;采用实qPCR技术检测胃黏膜组织IL-1β、SIgA的表达水平;采用石蜡切片以及H＆E（hematoxylin-eosin staining）染色光镜观察大鼠胃黏膜结构差异。结果:病理观察结果显示:NC组胃黏膜结构完整,上皮细胞和腺体排列整齐,腺体丰富,细胞呈简单柱状;CAG组大鼠可见胃黏膜层变薄、腺体细胞排列紊乱、明显减少;MHLD组可见腺体细胞排列相对整齐,腺体细胞减少较少。Q-PCR结果显示:与NC组对比,CAG组IL-1β表达水平显著升高;对比CAG组,MHLD组IL-1β表达水平显著降低;对比NC组,CAG组SIgA表达水平显著降低;对比CAG组,MHLD组SIgA表达水平显著提高。16S rDNA测序结果显示:在胃黏膜菌群中,与NC组对比,CAG组菌群丰富度（ACE、Chao1）无明显差异,多样性指数（Shannon和Simpson）以及均匀度（J）显著下降;MHLD组与CAG组相比,丰富度（ACE、Chao1）无明显差异,多样性指数（Shannon和Simpson）以及均匀度（J）显著上升;β多样性表明NC组与CAG组差异较大,MHLD组与NC组较为相似;通过LDAEffect Size分析发现MHLD组双歧杆菌科（Bifidobacteriaceae）、拟杆菌科（Bacteroidaceae）等明显增多,假单胞菌科（Pseudomonadaceae）等显著低于CAG组;菌群功能预测表明在肠道菌群中,丙氨酸、天门冬氨酸和谷氨酸代谢、氨基糖和核苷酸糖代谢、聚酮糖单位生物合成、果糖和甘露糖代谢和RNA降解在CAG组中显著下降,在MHLD组中均有上升;粪便肠道菌群分析结果显示三组丰富度（ACE、Chao1）、多样性指数（Shannon和Simpson）以及均匀度（J）无明显差异;β多样性表明三组间具有一定差异;通过LDAEffect Size分析发现MHLD组盐杆菌科（Dehalobacteriaceae）、韦荣氏菌科（Veillonellaceae）等显著高于模型组,理研菌科（Rikenellaceae）、肠球菌科（Enterococcaceae）、链球菌科（Streptococcaceae）、假单胞菌目（Pseudomonadales）等显著低于CAG组;菌群功能预测显示MHLD对脂肪酸生物合成及视黄醇的代谢有一定恢复作用。结论:MHLD能促进CAG大鼠修复胃黏膜病理形态,促进胃黏膜修复;显著降低IL-1β表达水平和提高SIgA表达水平。MHLD可恢复胃黏膜菌群多样性及菌群结构,恢复部分菌群功能,提高部分有益菌群,促进恢复胃粘膜及肠道菌群菌群失调。
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