激活素受体II结合蛋白基因的克隆、鉴定及激活素A和bFGF对纹状体多巴胺能神经诱导作用的研究

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为了详细探讨激活素的信号传递机制,以激活素受体ⅡA的细胞内段作饵用酵母双杂交方法筛选得到一个新的PDZ蛋白,命名为ARIP2,以ARIP2 cDNA为探针筛选鼠脑cDNA文库,得到ARIP2的全长cDNA序列及另一个新的PDZ蛋白,因其缺乏ARIP2的C末端序列,命名为ARIP2-short,通过ELISA、哺乳动物双杂交及免疫沉淀鉴定二者均可通过其N末端的PDZ功能区与ActRⅡA的C末端结合; ARIP2在CHO-K1细胞中的超表达可促进ActRⅡA的内化,而ARIP2-short则减少其内化; ARIP2可抑制FSH启动子的活性,并减少FSH mRNA的表达,而ARIP2-short则可增强FSH的活性并增加FSH mRNA的表达。为了研究激活素对胎鼠纹状体多巴胺能神经的诱导作用,我们取E14胎鼠纹状体,用ActivinA及bFGF刺激,用RT-PCR及免疫荧光染色对多巴胺能神经相关因子进行检测,结果显示ActivinA和bFGF可协同作用诱导纹状体干细胞向多巴胺能神经进行分化。
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