寄生蜂是田间防控害虫的重要生物防治因子之一,其在产卵时随之注入的毒液等寄生因子会抑制寄主的免疫反应,并调控寄主的生理过程,以保证寄生蜂后代的生长发育。中红侧沟茧蜂（Microplitis mediator）转录组数据显示其毒腺中存在转铁蛋白（Transferrin,Tsf）。转铁蛋白具有结合和运输铁离子等功能,是参与维持机体铁稳态的重要蛋白。铁是几乎所有生物体生存所必需的元素,并参与多项重要的代谢过程,对机体的正常生长发育不可或缺。为了探究MmTsf在中红侧沟茧蜂与寄主东方粘虫（Pseudaletia separata）互作过程中的功能,本研究利用原核表达系统表达并纯化了重组MmTsf蛋白;检测了MmTsf基因在寄生蜂组织中的表达情况以及在雌蜂中的RNA干扰效率;检测了不同处理下寄主血淋巴中铁离子浓度,以及干扰MmTsf后寄生,对子代蜂生长发育的影响。主要结果如下:1.利用生物信息学对MmTsf蛋白进行理化性质分析,其含有710个氨基酸,分子量为78.3 k Da,等电点为5.37,并具有一段19个氨基酸的信号肽。MmTsf含有两个保守的TR-FER结构域。在与多个物种的转铁蛋白进行序列比对后发现,位于MmTsf N端结构域的参与结合和稳定铁离子的氨基酸残基（一个天冬氨酸、两个酪氨酸及一个苏氨酸和一个精氨酸）高度保守。2.体外构建原核表达载体p ET-28a-MmTsf,并转化大肠杆菌,经诱导表达后,利用镍亲和柱纯化后获得重组MmTsf蛋白并制备抗体。经过脲素梯度透析,获得复性的重组MmTsf蛋白。活性检测表明其具有结合铁离子的能力。3.利用实时荧光定量检测MmTsf基因在雌蜂、卵巢、毒腺等组织和雄蜂中的表达情况,结果表明该基因在上述组织样品中均有表达。显微注射ds MmTsf,可降低中红侧沟茧蜂MmTsf的表达,24 h和48 h干扰效率达到70%左右。同时我们对注射ds MmTsf的雌蜂进行解剖,获得其卵巢以及毒液样品并经Western blot检测,结果显示成功干扰目的基因的雌蜂,其卵巢和毒液中MmTsf蛋白含量明显降低。4.检测不同处理下寄主血淋巴的铁离子浓度,发现相较于未被寄生的粘虫,寄生12 h和24 h后的粘虫血淋巴中铁离子浓度显著降低;用MmTsf-RNAi寄生蜂进行寄生,在寄生12 h后,寄主血淋巴铁离子浓度显著升高;向寄主体内直接注射复性后的重组蛋白,注射12 h后,寄主血淋巴的铁离子浓度显著降低;MmTsf-RNAi寄生蜂寄生粘虫后,通过显微注射将复性后的重组蛋白注入到寄主体内,处理组相较于对照组的铁离子浓度无明显差异。5.用干扰MmTsf后1 d的雌蜂寄生粘虫,并统计后代蜂在寄主体内的发育历期、出茧率、羽化率以及羽化时间。结果表明处理组与对照组的子代蜂在寄主体内的发育时期、出茧率和羽化时间均无明显差异,处理组的羽化率相较于对照组有显著下降,约20%的子代蜂不能正常羽化。综上所述,MmTsf是中红侧沟茧蜂的一种重要的毒液蛋白,具有结合寄主东方粘虫血淋巴中铁离子的功能,对子代蜂在寄主体内的正常生长发育以及羽化具有重要作用。