血管内皮细胞（VECs）是覆盖在血管腔中的单层细胞,在机体内,与血液直接接触。VECs在调节血管张力、血栓形成、稳态、单核细胞募集以及激素转运等过程中起关键作用。细胞凋亡是内皮细胞的一种主要损伤形式,它与许多心血管疾病的发展有关,常见的有动脉粥样硬化、糖尿病和高血压等疾病。因此,发现和鉴定新的内皮细胞凋亡抑制因子对于维持正常内皮细胞功能具有重要的意义。长非编码 RNA（long noncoding RNA,lncRNA）的长度大于 200 nt,没有编码成蛋白质的能力。越来越多的研究已经认识到lncRNAs在血管的生成、疾病诊断以及细胞生理等过程的调节中发挥关键的作用。去血清去生长因子是一个细胞模型,常用于凋亡的研究中。我们课题组发现一个苯并噁嗪衍生物ABO能够提高去血清去生长因子诱导凋亡情况下血管内皮细胞存活率。本研究中,我们将ABO作为内皮细胞的凋亡抑制剂,以此为工具,寻找参与此过程的新lncRNA。在本论文中,我们找到了新的lncRNA MROH7-TTC4,可以促进去血清去生长因子诱导凋亡情况下血管内皮细胞的存活。小分子化合物ABO能够显著升高MROH7-TTC4表达,尤其是细胞核中。由于ABO靶向ANXA7,抑制其GTPase活性,因此我们研究了 ANXA7调控MROH7-TTC4表达的机制,利用免疫共沉淀以及免疫荧光实验,发现ANXA7能够与5’-3’外切核酸酶XRN2相互作用,抑制ANXA7 GTPase活性后,XRN2磷酸化水平降低,促进MROH7-TTC4的通读转录。根据报道,MROH7-TTC4是由上游基因MROH7持续转录到下游基因TTC4产生的。为了阐明MROH7-TTC4的表达是否会影响MROH7和TTC4的表达,我们利用荧光定量PCR实验证明,下调MROH7-TTC4,MROH7和TTC4表达也随之降低。已有研究表明,通读转录lncRNA可以通过其两端的基因发挥功能,PHOSPHO2-KLHL23便是其中的一例。TIA1既可以与DNA结合,也可以与RNA结合,参与RNA加工过程,生物信息学分析显示,它可以与MROH7-TTC4结合,并且我们的实验结果也表明,ABO促进两者的结合。下调TIA1,MROH7和TTC4表达均降低。过表达及干扰实验结果表明,上调MROH7和TTC4均可抑制内皮细胞凋亡。已有研究证明TTC4在细胞周期调控中必不可少,但是在HUVECs凋亡中的作用机制仍然不清楚。根据其结构,TPR结构域能够与分子伴侣结合,因此我们检测了 TTC4与HSP70的结合情况,免疫荧光和免疫共沉淀的结果表明,两者能够结合。当阻断HSP70后,TTC4不再抑制内皮细胞凋亡。一方面,ABO能够降低ANXA7与HSP70的结合,促进HSP70与TTC4结合,提高下游Akt的表达,内皮细胞凋亡减少。另一方面,更多的ANXA7向溶酶体膜聚集,降低了细胞内Ca2+水平,减弱溶酶体膜通透性,从而抑制细胞凋亡。总之,我们以ABO为工具,发现了新的抑制内皮细胞凋亡的因子:lncRNA MROH7-TTC4,研究了MROH7-TTC4在内皮细胞凋亡中的表达调控及作用机制,对血管稳态及重构具有重要的意义,也为新药开发奠定了基础。