【摘 要】
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目的:
MicroRNA(miRNA)是新发现的一类能够调控其靶基因表达水平的小分子RNA家族。miRNA的调控作用涉及到生物体生长发育的很多过程,例如:肿瘤发生、发育及细胞凋亡等方
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目的:
MicroRNA(miRNA)是新发现的一类能够调控其靶基因表达水平的小分子RNA家族。miRNA的调控作用涉及到生物体生长发育的很多过程,例如:肿瘤发生、发育及细胞凋亡等方面。本研究利用细胞生物学、生物信息学、分子生物学技术验证了miR-181b的靶基因,并对其在肿瘤增殖、凋亡过程中所发挥作用进行研究。
方法:
首先利用荧光定量技术分析了miR-181b在小儿AML患者及正常小儿间的表达差异,随后联合运用生物信息学技术及分子生物学技术确定了miR-181b的靶基因MLK2。最后经MTT、软琼脂克隆形成等实验证实了miR181b在AML细胞凋亡及增殖过程中所发挥的重要调控作用。
结果:
1.通过表达谱芯片和荧光定量技术验证了miR-181b在AML患者中高表达。
2.利用生物信息学技术预测了miR-181b的候选靶基因MLK2,并通过荧光报告载体实验得到验证。
3.通过MTT、软琼脂克隆形成实验证实miR-181b能够通过其靶基因MLK2调节HL-60细胞增殖。
结论:
本实验首次证实了miR-181b的靶基因MLK2,并通过实验证明miR-181b可通过其靶基因MLK2调节HL-60细胞的增殖。对miR181b在肿瘤细胞凋亡和增殖过程中调节机制的研究,有助于更深刻了解肿瘤细胞自身的生物学特性,同时也可能为肿瘤的基因治疗提供一条新的途径。
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