燕麦液体培养灵芝多糖的组分构成与抗氧化活性分析

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灵芝多糖是灵芝中重要活性成分之一,具有抗氧化、免疫调节、抗肿瘤、降血糖、降血脂等多种功效。灵芝的人工栽培成本高、工艺复杂、生产周期长、过程不易控制,液体培养具有成本低、工艺简单、生产周期短、过程可控等优点。目前灵芝的液体培养所用的培养基多为合成或半合成培养基,鲜有以谷物为培养基的灵芝液体培养。论文研究了三种燕麦液体培养基(糊化燕麦、发芽燕麦、酶解燕麦)、一种半合成液体培养基和棉籽壳固体栽培所得菌丝体和发酵液(液体培养)或子实体(固体栽培)中多糖的组分构成及其抗氧化活性。研究中对多糖水提物和碱提物进行了分别研究。采用DPPH清除率、·OH自由基清除率和还原力三种方法对灵芝多糖的抗氧化活性进行分析。所得主要结果如下:(1)燕麦液体培养3~4天,灵芝菌体生长量即可达到最大值,而半合成培养基则需7天,固体培养获得子实体则需90~110天。燕麦液体培养可缩短灵芝菌丝体的培养时间。(2)与固体栽培所得灵芝子实体相比,燕麦液体培养所得菌丝体的多糖水提物的平均纯度为58.79%,是子实体的2.1倍,是半合成培养基所得菌丝体的90%;多糖碱提物的平均纯度为25.08%,是子实体的33%,是半合成培养基的89%。燕麦液体培养发酵液中的多糖产物的平均纯度为81.10%,是半合成培养基的1.01倍。相同多糖浓度条件下,燕麦液体培养所得菌丝体多糖水提物的平均抗氧化活性低于子实体,多糖碱提物的则高于子实体,两者均高于半合成培养基所得菌丝体多糖。三种燕麦培养基中,发芽燕麦培养所得各多糖提取物的抗氧化活性总体最高,其次为酶解燕麦,糊化燕麦最低。(3)经DEAE-纤维素分离纯化,固体栽培所得灵芝子实体多糖为四个组分,发芽燕麦培养所得菌丝体多糖水提物和碱提物为三个组分,其他多糖提取物均为两个组分。在所有培养方式中,不同多糖组分中的0.25mol/L NaCl洗脱组分的抗氧化活性最高,其次为0.1mol/L NaCl洗脱组分≈0.5mol/L NaCl洗脱组分,蒸馏水洗脱组分最低。
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