目的：本研究通过采用免疫组化染色和免疫组化荧光染色的方法观察SOX2、Nestin和BrdU阳性细胞在最后区的分布。　　方法：健康SD大鼠，6-8周龄，雄性，体重150－180克，12只，清洁级，其中6只制备BrdU模型。由河北医科大学动物中心提供。　　1 BrdU模型制备　　1.1配制BrdU生理盐水注射液：20毫克/毫升，用分析天平量取BrdU450毫克溶于22.5毫升生理盐水注射液。将配制好的生理盐水注射液放入45℃恒温干燥箱中使其充分溶解。溶解后，4℃保存。　　1.2注射：采用上述配制完毕的BrdU生理盐水注射液，按照每只50毫克/千克对实验动物进行腹腔注射。连续三天给药，每天两次，间隔两个小时。注射时间段为下午14时－16时。　　2光镜免疫组化石蜡标本制备：常规经心灌注、固定、取脑，冠状方向去除从第四脑室外侧隐窝以前脑组织，然后常规石蜡包埋，连续石蜡切片，片厚5um。常规甲苯胺蓝尼氏染色、SOX2免疫组化染色、Nestin免疫组化染色、BrdU免疫组化染色封片。显微镜观察、照相。　　3光镜免疫组化冰冻标本制备：麻醉、灌注、后固定的方法同光镜免疫组化石蜡标本，后固定结束后将相应组织块蒸馏水冲洗后放入15％蔗糖溶液至组织块沉入溶液底部，换入30％蔗糖溶液至组织块沉入溶液底部。参照大鼠脑切片图谱，选取包含有最后区的部分，采用恒温冰冻切片机切片，片厚10μm。常规甲苯胺蓝尼氏染色、SOX2免疫组化染色、Nestin免疫组化染色、BrdU免疫组化染色封片。显微镜观察、照相。　　4光镜荧光免疫组化石蜡标本和冰冻标本：荧光免疫组化石蜡标本的制备同光镜免疫组化石蜡标本的制备；荧光免疫组化冰冻标本的制备同光镜免疫组化冰冻的标本制备。　　5统计学处理：统计学处理采用SPSS13.0版统计软件。计量资料的各项指标均采用均数±标准差(x-±s)，同一指标的组间比较采用One-WayANOVA方差分析，分析前进行方差齐性检验，方差齐时用LSD法，P<0.05表示有显著性差异。　　结果：　　1甲苯胺蓝染色：在脑干的横断切面上，最后区位于脊髓中央管背侧，最后区与周围脑组织界限明显，染色较深，最后区呈尖向下的等腰三角形　　2免疫组织化学染色　　2.1 SOX2免疫组化染色：SOX2阳性细胞在最后区的腹侧部呈明显的V字形分布，与腹侧的脊髓中央管相连；在背侧部的软膜下也可见密集的细胞呈带状分布；在最后区的中央部阳性细胞散在分布，染色较淡。　　2.2 Nestin免疫组化染色：Nestin阳性细胞在最后区的腹侧部呈明显的V字形强阳性显色，V字形的两侧可延伸到近软脑膜下，V字形的中央部向腹侧可延伸到脊髓中央管附近。在背侧部的软脑膜下nestin有一明显的带状阴性区。在最后区的中央部呈弱阳性显色。　　2.3 BrdU免疫组化染色：最后区可见少量的BrdU阳性细胞表达，阳性表达细胞的细胞核呈椭圆形，其阳性细胞的细胞核较周围大部分阴性细胞的细胞核小。　　3免疫荧光染色　　3.1 SOX2免疫荧光染色：最后区的SOX2阳性细胞密集表达，腹侧部呈V字形，中央部散在表达。　　3.2 Nestin免疫荧光染色　　最后区可见Nestin阳性表达细胞呈V字形分布，其免疫阳性反应物多呈细颗粒状、少部分呈粗颗粒状，有的颗粒散在分布，有的颗粒呈簇状分布。有的呈长短不一的细丝状。　　3.3 BrdU免疫荧光染色：在最后区可见少量BrdU阳性表达细胞，有的散在分布，有的呈簇状分布。　　4免疫荧光双标染色　　4.1 SOX2、BrdU荧光双标染色：SOX2阳性细胞较密集分布，在密集的SOX2阳性细胞之间可见少量BrdU阳性细胞散在分布。　　4.2 SOX2、Nestin荧光双标染色：SOX2阳性细胞较密集分布，在密集的SOX2阳性细胞之间可见散在分布的Nestin阳性细胞。　　结论：　　1最后区SOX2阳性细胞密集表达，腹侧部阳性细胞呈V字形密集分布，背侧部带状密集分布阳性细胞，中央部阳性细胞散在分布。　　2最后区nestin强阳性细胞在腹侧部呈明显的V字形，在背侧部的软脑膜下nestin有一明显的带状阴性区。在最后区的中央部呈弱阳性显色。　　3最后区SOX2和BrdU双标细胞多见于最后区的背侧部。　　4最后区SOX2和Nestin双标细胞多见于最后区的腹侧部。