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本文主要从以下几个部分展开论述:
第一部分 实验一:电针刺足三里穴对Walker256肿瘤种植大鼠癌性疼痛和瞬时受体电位香草酸亚型1表达的影响
目的:研究电针刺足三里穴对接种Walker256细胞大鼠的癌性疼痛和脊髓背根神经节瞬时受体电位香草酸亚型1(transient receptor potential vanilloidsubfamily1,TRPV1)mRNA和蛋白表达的影响,探讨电针刺对癌痛的机制。
方法:采用随机法将32只大鼠平均分为4组(n=8):正常对照组(normalcontrol)、肿瘤对照组(tumor control)、假穴电刺激组(sham)和电针刺组(EA)。电针刺大鼠双侧足三里穴,每日1次,每次持续30 min。采用热平板实验、von Frey和自发疼痛行为实验评估接种Walker256细胞大鼠的热、机械性痛觉过敏和自发疼痛。应用实时定量PCR和Western blot检测脊髓背根神经节TRPV1 mRNA和蛋白的表达水平。
结果:接种Walker256细胞后6天,tumor control、sham和EA组均出现明显的机械性痛觉过敏(P<0.05)。与sham和tumor control相比,在同侧后脚掌接种Walker256细胞后6天,EA组明显减轻癌症引起的机械性痛觉过敏(P<0.05)。接种Walker256细胞后5天,tumor control、sham和EA组自发性疼痛反应明显增加(P<0.05)。与tumor control和sham组相比,接种Walker256细胞后5天,EA减轻自发性疼痛反应(P<0.05)。接种Walker256细胞后2天,tumor contron、sham和EA组均出现明显热痛觉过敏(P<0.05)。与tumor control和sham组相比,接种Walker256细胞后2天,EA明显减轻热痛觉过敏(P<0.05)。接种Walker256细胞后10天,tumor control组TRPV1 mRNA水平明显高于normal control组(2.30±0.11 vs0.85±0.05;P<0.05)。EA组与tumor control组相比,TRPV1 mRNA表达明显下降(1.20±0.08 vs2.3±0.11;P<0.05)。接种Walker256细胞后10天,tumor control与normal control组相比,TRPV1蛋白水平明显增加(1.37=0.03、vs0.58±0.03;P<0.05)。EA组与tumor control组相比,TRPV1蛋白水平明显下降(0.89±0.05vs1.37±0.04;P<0.05)。
结论:电针刺足三里穴通过抑制接种Walker256细胞大鼠脚掌趾所引起的同侧TRPV1 mRNA和蛋白水平,减轻由接种Walker256细胞所引起的癌性疼痛。
第二部分 实验二:电针刺环跳穴对大鼠癌痛及瞬时受体电位香草酸亚型1mRNA表达的影响
目的:研究电针刺环跳穴对接种Walker256细胞大鼠的癌性疼痛和脊髓背根神经节瞬时受体电位香草酸亚型1(transient receptor potential vanilloid subfamily1,TRPV1)mRNA表达的影响,探讨电针刺对癌痛的机制。
方法:采用随机法将32只大鼠平均分为4组(n=8):正常对照组(normal control)、肿瘤对照组(tumor control)、假穴点电刺激组(sham)和电针刺组(EA)。电针刺大鼠双侧环跳穴,每日1次,每次持续30 min。采用热平板实验、von Frey和自发疼痛行为实验评估接种Walker256细胞大鼠的热、机械痛觉过敏和自发疼痛。应用实时定量PCR检测脊髓背根神经节TRPV1 mRNA的表达水平。
结果:接种Walker256肿瘤细胞能引起明显的癌性疼痛(P<0.05),电针刺环跳穴能减轻癌性疼痛(P<0.05)。接种肿瘤细胞后,背根神经节TRPV1 mRNA表达升高(P<0.05),但电针刺治疗后对其表达无明显变化。
结论:电针刺环跳穴能减轻由接种Walker256细胞大鼠脚掌趾部所引起癌性疼痛,但其镇痛机制与背根神经节TRPV1 mRNA表达无明显关系。