双酚A对小鼠肝、肾氧化损伤的影响

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目的:本研究通过对小鼠进行双酚A(BPA)灌胃染毒,观察低剂量BPA导致的小鼠肝肾组织病理学改变,并检测其引起的氧化损伤程度为全面评价低剂量(机体可接受的剂量)BPA对人群的健康危害提供科学依据。方法:1.选取72只4周龄健康清洁级(KM)雄性小鼠,按体重随机分成4组,3个BPA染毒组,1个空白对照组,每组18只。空白对照组:玉米油灌胃;染毒组:分别予以0.4μg/kg、4μg/kg、40μg/kg的BPA玉米油溶液灌胃。每天染毒,分别于染毒的第10天、15天、30天,每组处死6只动物,在整个实验期间观察小鼠的生长发育等情况变化。2.染毒结束后对小鼠进行称重,采用颈椎脱臼法处死小鼠,打开腹腔,分离出完整肝脏和肾脏称重,并根据染毒结束后小鼠的体重和脏器的重量计算肝脏、肾脏的脏器系数(ROW);取部分肝组织和肾组织进行苏木素-伊红(HE)染色,光镜下观察小鼠肝脏和肾脏病理组织学改变,其余组织用于制备匀浆做生化指标分析。3.采用WST-1法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,采用紫外分光法测定过氧化氢酶(CAT)活性和羟自由基含量,采用化学比色法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性、丙二醛(MDA)的含量、过氧化氢以及超氧阴离子自由基的含量。结果:1.对照组小鼠好动,BPA染毒组小鼠活动减少;各剂量组染毒10d后小鼠体重增长差别不明显,与对照组相比较差异无统计学意义(P>0.05);各染毒剂量组染毒15d及30d后小鼠体重增长有差异,与对照组比较有统计学意义(P<0.05)。2.染毒10天、15天、30天后各染毒组之间的肝脏脏器系数均有差异(P<0.05),并且各剂量组在不同时间段肝脏脏器系数差异明显(P<0.05);染毒10天后各个染毒组之间的肾脏脏器系数无明显差异(P>0.05);而染毒15天和30天后各染毒组之间小鼠肾脏脏器系数有差异(P<0.05)。各剂量组在不同时间段肾脏脏器系数差异明显(P<0.05)。肝脏病理学观察显示,对照组肝组织正常,各染毒组随着染毒剂量的增高和染毒时间的延长,肝组织逐渐出现炎症细胞侵润及肝细胞核固缩,并出现肝组织大片灶性变性、坏死等病理改变。各BPA染毒组的肾脏组织也逐渐出现肾小球渗出物及肾小管水变性。3.BPA各染毒组中抗氧化酶SOD、CAT、GSH-Px的活性与BPA浓度有剂量效应关系,低剂量组染毒第15天和第30天亦有明显差异,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);同染毒剂量不同时间段的差异有统计学意义(P<0.05);各染毒组中氧自由基OH-、O2-、H2O2及脂质过氧化物MDA含量与BPA浓度有剂量效应关系,差异有统计学意义(P<0.05);同染毒剂量不同时间段的差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1、BPA可致小鼠肝肾组织病理学改变。各剂量BPA染毒可引起肝组织发生炎症及核固缩现象,肾小管上皮细胞水变性等病变。2、BPA可致小鼠肝肾组织发生氧化损伤。不同低剂量BPA染毒可致肝、肾组织中氧自由基浓度随染毒时间延长而增加,并导致抗氧化酶活性随染毒时间的增加而降低。说明低剂量BPA可通过氧化应激反应破坏机体氧化平衡,造成氧化损伤。
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