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目的为了明确喉癌组织中是否有SATB1 mRNA和蛋白表达,进一步探讨SATB1表达的临床意义。材料与方法一、实验材料收集2007至2009年间在中国医科大学附属盛京医院耳鼻咽喉科手术治疗的80例喉癌组织标本,对照组:选取其中的25例喉全切除术标本中,距离肿瘤边缘>2.0cm的粘膜组织作为对照组。二、实验方法1、real-time PCR方法检测SATB1 mRNATrizol一步法提取总RNA。逆转录成cDNA后,进行real-time PCR扩增。SATB1引物:扩增长度147bp上游:5’-GCA AGC CCT GAG TTC TGT T-3’下游:5’-CTA TGA ATA AGC CTT TGG AGC-3’2、Western印迹检测SATB1蛋白取组织块提取细胞总蛋白,10%的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,转印后用抗SATB1和抗β-actin抗体孵育。加入用碱性磷酸酶标记的相应二抗,显色后置于凝胶成像仪成像。3、免疫组化检测SATB1蛋白SP免疫组织化学方法,实验步骤按试剂盒说明书进行。4、统计学分析应用SPSS17.0软件进行统计分析。Western印迹的蛋白结果应用χ2检验统计,real-time PCR的结果用均数±标准差(mean±SD)表示。SATB1 mRNA的表达和临床病理参数的关系采用T检验。P<0.05被认为统计学有意义。结果1、所有的肿瘤标本均有SATBlmRNA表达;而64%(16、25)的喉正常黏膜有SATB1mRNA表达。经χ2检验,SATB1 mRNA水平在喉癌和正常黏膜之间有显著的统计学差异(χ2=27.07;P<0.001)。喉癌中SATB1 mRNA表达的相对值是5.00±2.48;正常黏膜中SATB1 mRNA表达的相对值是0.99±0.88。喉癌中SATB1的mRNA表达水平是正常黏膜的2.52-7.48倍;这个表达的差异有统计学意义(P<0.001)。2、66.25%(53、80)的喉鳞状细胞癌有SATB1蛋白表达;所有黏膜均无SATB1蛋白表达。β-actin蛋白在喉鳞癌和正常黏膜中表达水平相似。SATB1蛋白表达水平的差异有统计学意义(χ2=33.44;P<0.001)。3、喉癌组织中SATB1蛋白主要定位于细胞核和细胞浆,而黏膜中没有SATB1蛋白表达。4、不同的性别、年龄、肿瘤位置及T分期之间的SATB1 mRNA水平没有统计学差异。颈部有淋巴转移的病例、临床分期Ⅲ期和Ⅳ期的病例以及细胞分化为中低分化的病例SATB1 mRNA水平分别显著高于颈部无淋巴转移的病例、临床分期为Ⅱ期的病例以及细胞分化为高分化的病例结论1、喉癌组织中存在SATB1 mRNA和蛋白的表达。2、喉癌组织中SATB1 mRNA和蛋白表达水平高于对照黏膜组织,二者之间差异具有统计学意义。3、SATB1 mRNA的表达和喉癌的临床分期、病理分化程度以及颈部淋巴结转移状态相关。