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目的： 研究肾上腺髓质素对体外培养的卵巢癌细胞以及在体肿瘤中生长的作用，为临床肿瘤治疗新靶点的研究提供有效的参考依据。 方法： 首先准备了三组卵巢癌细胞系，分别为 A2780、SKOV3、HO-8910 在10%胎牛血清的条件下培养，在培养至对数生长期后进行低氧诱导，分析在低氧条件下ADM、VEGF以及HIF-1α的mRNA表达水平进行检测，比较低氧条件对三类基因转录水平的影响。使用ADM处理后，用流式细胞仪来检测细胞凋亡的情况。 然后使用ADM-shRNA质粒及NC-shRNA转染各组细胞，对ADM基因的表达进行抑制后使用筛选出可稳定表达 ADM-shRNA 的细胞系，将该细胞系注射于裸鼠皮下，一周后建模成功。待皮下肿瘤成瘤后，选择成瘤大小相当的裸鼠随意编号并分组，分组后的裸鼠按照用药的不同分装进鼠笼中，编号并标记，分别为：①盐水+PBS组、②盐水+NC-shRNA组、③盐水+shADM组、④顺铂+PBS组、⑤顺铂+NC-shRNA 组、⑥顺铂+shADM 组。各组裸鼠每天腹腔内注射 5 mg/kg的顺铂或皮下肿瘤内注射10?g/kg的ADM-shRNA。对照组分别腹腔注射等体积盐水、皮下肿瘤内注射PBS或NC-shRNA作为对照。在连续观察肿瘤的生长，并观察28天以后，根据肿瘤体积来绘制生长曲线，然后取出肿瘤组织来进行相关指标的检测。 结果： 首先我们研究了低氧环境是否影响卵巢癌细胞ADM表达，以及其他促癌基因如 VEGF、HIF-1 的表达。RT-PCR 结果发现，在 A2780 卵巢癌细胞中 ADM的mRNA表达随低氧时间的增加而出现显著增高（F(3, 8)= 9.054，P=0.0067）。其中，24 h低氧组ADM的mRNA表达量比对照组升高3.72倍（P＜0.0001）。而VEGF、HIF-1α的mRNA表达量同样随低氧时间延长而出现不同程度的升高（VEGF：F(3, 8)= 5.370，P=0.0364；HIF-1α：F(3, 8)= 7.288，P=0.0297）。 在SKOV3细胞系中（图1B），单因素方差分析结果发现低氧环境对ADM、VEGF、HIF-1α的表达都有显著影响（ADM：F(3, 8)= 26.018，P=0.0065；VEGF：F(3, 8)= 10.661，P=0.0087；HIF-1α：F(3, 8)= 49.9，P＜0.0001）。 在HO-8910细胞系，低氧环境下ADM、VEGF、HIF-1α的表达同样显著增高（ADM：F(3, 8)= 11.51，P=0.0096；VEGF：F(3, 8)= 4.304，P=0.0412；HIF-1α：F(3, 8)= 11.7，P=0.0087）。多重比较发现，24 h低氧使ADM mRNA表达上升4.13倍（ P＜0.0001 ）。与之相对应， VEGF、HIF-1α 的表达则比对照组升高 3.46 （P=0.0079）和3.91倍（P＜0.0001）。 卵巢癌细胞 HO-8910 进行质粒转染后，经流式细胞术检测转染效率达到87.1%，转染效率较高。转染72 h后对转染细胞进行蛋白及mRNA表达分析， shADM组细胞的ADM表达量比对照组降低48.2%（P=0.0544），mRNA比对照组降低26.9%（P＜0.0001），而NC-shRNA组ADM蛋白及mRNA表达与正常对照组无差异。这表明通过转染ADM-shRNA成功沉默了ADM在细胞中的表达。随后通过流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。稳定表达 ADM-shRNA 的HO-8910细胞其凋亡细胞比例显著高于正常组（shADM组：42.65%；正常组：8.4%；二者相比 P=0.0031 ）。而 NC-shRNA 组与正常组相比无显著差异（NC-shRNA组：12.2%；二者相比P=0.461）。以上结果表明ADM基因沉默可显著促进卵巢癌细胞凋亡。 对ADM基因沉默对实体瘤生长的影响研究中可见，与盐水+PBS组相比，腹腔注射顺铂的各组裸鼠肿瘤体积有明显减小。而顺铂+shADM组的抑瘤率高达71.39%，显著高于顺铂+PBS 组的 39.21%或盐水+shADM 组的 49.45%（P=0.0347）。随后我们分析肿瘤组织内的 ADM 表达量，结果见图 3B。双因素方差分析表明，腹腔注射顺铂（F1,30= 8.37，P=0.0057）和瘤内注射ADM-shRNA （F2, 30= 27.59，P＜0.0001）对肿瘤生长都具有一定抑制作用。此外，顺铂和ADM-shRNA还具有显著的交互作用（F2, 30= 0.66，P=0.0466）。多重检验表明，盐水+shADM 组的蛋白表达显著低于盐水+PBS 组（P=0.0087），顺铂+shADM组的ADM蛋白表达显著低于顺铂+PBS组（P＜0.0001）。以上结果表明，顺铂与ADM基因沉默对裸鼠在体瘤具有显著的协同抑瘤作用。 结论： 1.低氧能使卵巢癌细胞中ADM高表达，并诱导促癌基因VEGF、HIF-1α的表达增高。 2.ADM基因沉默可显著促进卵巢癌细胞凋亡。 3.顺铂与ADM基因沉默对裸鼠在体瘤具有显著的协同抑瘤作用。