整合素α<,5>、β<,3>在子宫内膜异位症中表达的研究

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目的:探讨整合素在子宫内膜异位症在位内膜和异位内膜中的表达及其性激素依赖性,并研究雌激素、孕激素、抗雌激素制剂、抗孕激素制剂对体外培养的人异位子宫内膜细胞整合素α5、β3mRNA表达的影响,寻求整合素在子宫内膜异位症发生发展过程中的作用,为临床诊断和治疗该疾病做进一步努力。方法:1.体外培养(1)用酶消化法处理异位内膜组织,进行原代细胞培养。用鼠抗人细胞角蛋白抗体进行上皮细胞鉴定及纯度分析。(2)用MTT法检测不同浓度的17β-雌二醇、安宫黄体酮、米非司酮、三苯氧胺对体外培养的异位内膜细胞活力的影响。(3)原代细胞全部或大部分融合后传代并分组:正常组(非药物干预组)、17β-雌二醇(E2)组、安宫黄体酮(P)组、米非司酮(Ru486)组、三苯氧胺(TAM)组,继续培养。(4)体外培养的细胞在含有浓度为10nmol/LE2、100nmol/LP、1000nmol/L Ru486、1000nmol/L TAM的DMEM/F12培养液中继续培养57天后进行收获,用RT-PCR技术对各组细胞中整合素α5、β3mRNA的表达水平进行检测。临床实验部分:(1)采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,对18例内异症患者在位内膜、异位内膜(研究组)和18例非内异症患者宫内膜(对照组)行整合素α5、β3mRNA的检测。(2)同期放射免疫法测定内异症患者体内雌二醇(E2)、孕酮(P)、CA125水平,对内异症患者术中行AFS-r评分。结果:(1)原代细胞培养的成功率达44.4%(8/18)。(2)E2、P分别在浓度10nmol/L、100nmol/L即表现出明显的促细胞生长作用,而TAM、RU486在浓度1,000nmol/L才表现出抑制细胞生长的效果,而且表现出一定的量效相关性。(3)与对照组整合素α5的表达水平(1.082±0.069)相比,E2组(1.415±0.286)及P组(1.304±0.170)中整合素α5的表达水平均显著增高(P<0.05),而TAM组(0.882±0.013)及RU486组(0.866±0.054)则显著降低(P<0.05);整合素β3在E2组及P组的表达水平分别为0.844±0.003、0.803±0.005,与对照组的0.703±0.009相比,差异有统计学意义(P<0.05),而TAM组(0.604±0.003)及RU486组(0.592±0.011)中整合素β3表达水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)整合素α5、β3在内异症在位内膜、异位内膜及对照组宫内膜中均有不同表达。整合素α5 mRNA在内异症在位内膜、异位内膜及对照组宫内膜中表达水平分别为0.773±0.113、1.077±0.032、0.924±0.120,各组间比较具差异有统计学意义(P<0.05);整合素β3 mRNA在内异症在位内膜、异位内膜及对照组宫内膜中表达水平分别0.653±0.080、、0.963±0.132、0.763±0.090,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。(5)内异症组血清E2水平与异位内膜整合素α5、β3mRNA表达均呈正相关性,相关系数分别为0.793、0.917,P均小于0.05, CA125水平与异位内膜整合素α5、β3mRNA表达均呈正相关性,相关系数分别为0.763、0.754,P均小于0.05,AFS-r与异位内膜整合素α5、β3mRNA表达均呈正相关性,相关系数分别为0.801、0.773,P均小于0.05。结论:整合素α5、β3在内异症发生发展中起着一定作用。(1)E2、P能刺激异位内膜细胞的生长,而TAM、RU486则抑制异位内膜细胞的生长,而且表现出一定的量效依赖性。(2)整合素α5、β3表达受雌、孕激素调控,E2、P上调整合素α5、β3的表达, TAM、RU486抑制整合素α5、β3分子表达。(3)内异症异位内膜组织中整合素α5、β3高表达可能与内异症粘连形成有关。(4)整合素α5、β3分子有望与CA125一样作为辅助诊断内异症的相关指标。
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