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桦褐孔菌Inonotus obliquus (Fr.) Pilat被誉为“西伯利亚灵芝”十六世纪以来被西伯利亚、北美、北欧等地作为传统医药广泛应用。目前但桦褐孔菌人工驯化刚刚起步,其来源主要靠采集,而桦褐孔菌在自然条件下生长缓慢,这使其开发利用受到了很大的限制。随着液体发酵技术的日渐成熟,利用液体深层发酵技术短时间内获得大量的桦褐孔菌液体发酵产物,已成为获取活性成分的一种有效途径。本文通过液体深层发酵,获得大量发酵产物,并对其化学成分进行系统的研究,对其单体化合物进行提取分离,并对单体化合物的药理活性进行研究。结果表明桦褐孔菌发酵产物具有抑菌,抑制麦芽糖酶活性作用。1.本实验对桦褐孔菌发酵产物化学成分进行了系统的研究。利用溶剂萃取法、硅胶柱色谱法、高效液相色谱法、GC-MS分析法相结合的手段,对桦褐孔菌发酵产物的石油醚层和乙酸乙酯层进行了研究,结果从石油醚层检测得到34个峰鉴定出29个主要化合物。从乙酸乙酯层分离得到4个单体化合物,应用现代波谱技术(MS,1H-NMR,13C-NMR, DEPT135等)对4个化合物进行了结构鉴定,分别为苯甲酸、已二酸甲酯、3β,22-dihydroxy-lanosta-7,9(11)24-triene、桦褐孔菌醇。其中苯甲酸与已二酸甲酯为首次从桦褐孔菌中分离。2.本实验研究桦褐孔菌Inonotus obliquus发酵浸膏各极性成分抑菌活性。以革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、克氏库克菌kocuria kristinae、粪肠球菌Streptococcus faecalis和革兰氏阴性菌大肠杆菌Escherichia coli、鼠伤寒沙门氏菌Salmonella typhimurium、阪崎肠杆菌Enterobacter sakazakii、绿脓假单胞菌Pesudomonas pyocyaneum为受试菌,青霉素,链霉素为阳性药,采用滤纸片法筛选其抗菌活性部位,利用各种色谱技术进行分离纯化,根据理化性质和谱学数据进行结构鉴定。结果发现发酵浸膏的石油醚层与乙酸乙酯层抑菌活性均有抑菌效果,其中乙酸乙酯层的抑菌效果明显,克氏库克菌的抑菌活性高达82.61%。并将得到的单体化合物苯甲酸与乙酸乙酯层的抑菌效果进行比较,推测乙酸乙酯层的抑菌活性成分可能为苯甲酸。3.本论文探讨了已二酸甲酯对麦芽糖酶的抑制作用。在磷酸钾缓冲液(pH=6.8)中加入DMSO(1mg/mL)和麦芽糖酶(1U/mL),37℃水浴放置10min后,再依次加入不同浓度的已二酸甲酯溶液,最后加入底物PNPG(50mmol/ml),37℃恒温20min,以Na2CO3终止反应,于400nm下测吸光度值。发现已二酸甲酯对其具有抑制作用。