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近年来,犬乳腺肿瘤的发病率呈现逐年升高的趋势,已成为兽医临床常见的肿瘤疾病之一,但目前犬乳腺肿瘤发生机理尚未明晰,尚无理想的治疗方案。实验动物模型能够模拟疾病的发生、发展过程,缩短研究的时间与成本。故本研究将绿色荧光蛋白(GFP)标记到犬乳腺肿瘤CHMm、CHMp细胞系中,利用上述细胞建立裸鼠成瘤模型,观察肿瘤动态演变,研究其发生发展规律并探讨其生物学特性,为日后深入研究犬乳腺肿瘤的致病机制、治疗方案等提供动物模型。本实验利用慢病毒将绿色荧光蛋白(GFP)导入犬乳腺肿瘤CHMm和CHMp细胞中,经有限稀释法筛选出绿色荧光蛋白标记的犬乳腺肿瘤细胞CHMm-GFP和CHMp-GFP。采用细胞悬液注射法将稳定表达绿色荧光蛋白的犬肿瘤细胞CHMm-GFP和CHMp-GFP注入裸鼠体内,建立裸鼠成瘤模型。模型建立后,观察裸鼠的状态,记录裸鼠体内肿物的大小与裸鼠体重,分别在不同时间段(25天、35天、45天和60天)解剖裸鼠,再利用裸鼠活体成像检测、离体脏器成像检测与病理学检测,比较研究不同细胞系在裸鼠体内的生物学特性。结果显示:有限稀释法方法筛选出的犬乳腺肿瘤细胞CHMm-GFP和CHMp-GFP绿色荧光蛋白表达率高,多次传代后细胞形状和状态无变化,绿色荧光信号稳定。细胞悬液注射至裸鼠右侧第二对乳头处后,第6天出现肉眼可见肿块,肿块生长曲线和裸鼠体重变化曲线表明,接种后两组模型中裸鼠肿块体积增长速度各有不同,在接种后30天,CHMp-GFP组肿块快速增长。接种后25天裸鼠活体成像,CHMm-GFP组裸鼠体内荧光信号最强,而CHMp-GFP组则在35天,裸鼠体内荧光信号最强。两组裸鼠接种后25天离体脏器成像,各有1只裸鼠淋巴结开始显现荧光信号,35天3只裸鼠淋巴结内均显示荧光信号,其他脏器无荧光信号。病理组织学显示,两种细胞系导致皮下肿块均为肿瘤,两种细胞系成瘤率均为100%。25天时病理组织切片,两种细胞系分别有1只裸鼠的肿瘤转移至淋巴结内,在35天、45天和60天时解剖裸鼠,发现肿瘤均已转移到淋巴结。本实验成功将绿色荧光蛋白标记到犬乳腺肿瘤细胞CHMm和CHMp中并建立裸鼠成瘤模型探讨其生物学特性,发现CHMm-GFP成瘤模型中肿瘤前期生长速度较快但肿瘤平均体积较小,CHMp-GFP成瘤模型中肿瘤后期生长速度快且肿瘤平均体积大,两种裸鼠成瘤模型中肿瘤均能转移至淋巴结内,为日后深入研究犬乳腺肿瘤提供基础。