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环孢素（cyclosporine A，CyA）是由11个亲脂性氨基酸组成的中性环状多肽，20世纪80年代以来被广泛地应用于临床器官移植，用以提高移植后的存活率，已经成为当前最主要的免疫抑制剂之一。CyA因在水中几乎不溶并受到肠道及肝脏中的代谢酶细胞色素P4503A4（CYP3A4）的代谢和肠道外向转运载体蛋白P-糖蛋白（P-gp）的外排作用，而使口服生物利用度较低（20％-50％）。本文研制CyA固体分散体，并探讨载体对CYP3A活性和P-gp外排作用，以期通过提高CyA溶解度和溶出速度、载体对CYP3A活性和P-gp外排作用的抑制来提高该药物的口服生物利用度。首先，以泊洛沙姆407（F127）、泊洛沙姆188（F68）、硬脂酸聚烃氧（40）酯（PS）及PVPK-29／32为载体，以溶剂法及溶剂—熔融法制备了CyA固体分散体。红外光谱的结果显示，药物与载体间无明显的相互作用；差示扫描量热分析（DSC）、热台显微镜（HSM）、X-射线衍射（PXRD）等结果显示所制备的固体分散体中药物均以无定型或分子状态存在，而在物理混合物中则以结晶形式存在。以F127、F68及PS为载体制备的固体分散体在0.1％十二烷基硫酸钠（SLS）中60min的累积溶出百分率超过90％，而以PVP为载体制备的固体分散体在0.1％SLS中60min的累积溶出百分率则低于70％。以水为溶出介质时，PS／CyA固体分散体随着PS／CyA比例的增大，60min药物累积溶出百分率加大，当PS／CyA比例超过7∶1时，药物溶出速度不随PS增加而加快，在此比例以上的固体分散体的累积溶出百分率均超过90％；而以F68、F127为载体制备的固体分散体在水中的溶出呈现倒钟状，表明这两种载体对药物的增溶作用有限，难以维持药物溶出时的漏槽状态。溶剂-熔融法制备固体分散体过程中的乙醇用量、搅拌速度、水浴温度、粉体粒度在实验范围内均不影响药物的溶出度。最终确定制备条件为：4ml／g的乙醇用量、800rpm的搅拌速度、65℃制备温度及80目粉体。加入2％的微粉硅胶可显著提高粉体的流动性。灌装胶囊后，影响因素实验的结果表明光、高湿及高溫均可使CyA固体分散体胶囊的有关物质含量增加，其中高温还会降低本品的溶出度，高湿（25℃、RH92.5％）条件下易吸潮变质，说明本品对高温和高湿更加敏感，因此产品应密闭防潮包装，并在贮存时避免高温。加速实验及长期试验结果表明，CyA胶囊经双层铝塑复合膜包装后，在40℃／75％RH条件下放置一个月，溶出度即显著下降，PXRD结果显示药物重新析出结晶。在30℃／60％RH放置六个月及在25℃／60％RH贮存十八个月基本稳定。大鼠分别以1mg／100g的剂量灌胃给予CyA固体分散体与Neoral?后，两者的血药浓度—时间曲线相似，CyA固体分散体和Neoral?的各动力学参数如下：Cmax分别为2348.65±495.96和2557.38±555.09ng／mL；Tmax分别为2.00±0.67和1.71±0.67h、AUC0-60分别为40283.99±5203.16和41021.10±6239.87ng／mLh；MRT0-60分别为17.96±1.88和17.97±1.29h。CyA固体分散体的AUC为Neoral?的98.20％，表明CyA制成固体分散体后，大鼠口服后可有效地促进药物在胃肠道的吸收，达到与自微乳化制剂相似的吸收效果。健康志愿者单次口服CyA固体分散体胶囊与参比制剂自微乳化软胶囊后，CyA固体分散体和Neoral?的各动力学参数如下：Cmax分别为1500.3±348.8和1742.9±361.3ng／mL；Tmax分别为2.63±0.55和1.39±0.49h；AUC0.24分别为7993.0±2535.1和8295.6±2295.6ng／mLh；AUC0-∞分别为8851.7±2815.0和9258.0±2523.7ng／mLh；MRT0-24分别为6.48±1.15和5.76±1.04h。两者的AUC0-24、AUC0-∞、Cmax具有生物等效性。Tmax经Wilcoxon sign检验，试验制剂与参比制剂在统计学上有差异（P＜0.01），试验制剂的达峰时稍晚。大鼠在体肠回流结果表明，CyA在十二指肠、空肠和回肠的吸收之间无显著性差异（P＞0.05），明显优于结肠（P＜0.01），说明CyA在小肠段吸收较好。在实验浓度范围内，药物累积吸收量与CyA浓度呈正比，说明药物吸收为被动扩散过程，提高药物在胃肠道中的溶解度有利于药物吸收。降低回流液中Na+浓度，单位面积药物的累积吸收量无显著性差异，表明药物吸收为非Na+依赖。相同浓度的新山地明与固体分散体溶液回流后，药物的累积吸收量之间无显著性差异，再次证明两种制剂的吸收程度相似。采用人肝微粒体，考察了PS对CYP1A2，CYP2A6，CYP2D6，CYP3A4各酶活性的影响，发现PS对CYP1A2，CYP2A6，CYP2D6和CYP3A4均有一定的抑制作用，且均随PS浓度的增大，抑制作用加强。抑制CYP1A2，CYP2A6，CYP2D6和CYP3A4酶活性50％所需PS的浓度(IC50)分别为0.3705，1.942，1.005和0.6585mg／mL。PS对各酶抑制作用由大至小分别为CYP1A2、CYP3A4、CYP2D6和CYP2A6。表明PS在体内可能抑制CYP3A4而增加CyA的吸收。不同浓度的PS均可显著提高P-gp底物罗丹明123（R123）细胞内摄取量和肠腔侧（A侧）至基底侧（B侧）的转运量，同时显著降低R123从B侧至A侧的排放量（P＜0.05）。且均在PS为150μg／mL时作用最大。不同浓度的PS均可显著降低DPH的各向异性，增加细胞膜的流动性（P＜0.05）。且随着PS浓度的增大，对膜流动性的影响作用加强。60min后细胞膜流动性基本不再随时间而改变。去除PS后，细胞膜流动性均在30min内快速回复，表明PS是安全的，对细胞膜流动性的影响是可逆的过程，不会给细胞带来永久的损伤。PS在考察时间和考察浓度范围内均不消耗细胞内ATP，不影响P-gpATP酶活性。