论文部分内容阅读
【目的】为了替代传统的本动物保护试验评价口蹄疫(FMD)灭活疫苗,建立简便易行、重复性好和便于标准化方法,本研究拟建立小鼠模型来评价口蹄疫灭活疫苗免疫效力。【方法】(1)制苗病毒抗原液中146S颗粒含量测定:浓缩各制苗病毒抗原液,蔗糖密度梯度离心、紫外分光光度计法检测并计算146S颗粒含量。(2)小鼠模型的建立:猪FMD O型灭活疫苗(Ⅱ)060217批、060326批,牛、羊FMD O、Asia-I型双价灭活疫苗060105批的三个批次疫苗分别免疫BALB/c小鼠,采血后检测血清抗体;疫苗同源强毒FMDV ON MF7攻击060217批猪FMD O型灭活疫苗(Ⅱ)免疫小鼠,同源疫苗强毒FMDV OZMF9攻击060326批猪FMD O型灭活疫苗(Ⅱ)免疫小鼠,同源疫苗强毒FMDV ON MF7、Asia-I MF15攻击060105批牛、羊FMD O、Asia-I型双价灭活疫苗免疫小鼠,通过乳鼠感染试验观察免疫小鼠攻毒保护情况,根据Reed-Muench法计算小鼠PD50值。【结果】(1)制苗病毒抗原液(灭活疫苗)中146S颗粒含量,ON 06026批[猪FMD O型灭活疫苗(Ⅱ)060217批]为75.3ng/mL(75.3ng/剂量),OZ 06041批[猪FMD O型灭活疫苗(Ⅱ)060326批]为75.7ng/mL(75.7ng/剂量),ON 06005批和Asia-I 06001批混合液[牛、羊FMD O、Asia-I双价疫苗060105批]为61.2ng/mL(61.2ng/剂量)。(2)060217批、060326批、060105批疫苗的分别免疫小鼠均产生特异性抗体,抗体滴度随时间延长而升高,第28天抗体滴度达到峰值;疫苗同源强毒攻击免疫小鼠PD50值,060217批疫苗免疫鼠为3.55,060326批疫苗免疫鼠为4.53,060105批疫苗免疫鼠分别为3.09和3.49,各疫苗相应本动物PD50值依次分别为6.3、6.3、3.6和5.4,小鼠PD50与本动物PD50值的增长规律有一定对应关系。【结论】本研究初步证明,BALB/c成年小鼠攻毒保护试验与乳鼠感染试验相结合的方法可用于口蹄疫灭活疫苗免疫效力评价。