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目的:通过体外实验观察奥曲肽(octreotide OCT)对人结肠癌SW480细胞增殖、细胞凋亡及细胞周期的影响;探讨奥曲肽对结肠癌SW480细胞中凋亡相关基因Fas、Survivin表达的影响;探讨其诱导结肠癌SW480细胞凋亡的可能机制。方法:1细胞培养:将人结肠癌SW480细胞置于1640培养液(含10%小牛血清,青霉素100U/ml,链霉素100U/ml)中培养,2-3天传代一次。2不同浓度的奥曲肽作用于人结肠癌SW480细胞后,应用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)比色法测定细胞光密度值(optical density,OD),计算生长抑制率。研究奥曲肽对人结肠癌SW480细胞增殖的影响。3应用流式细胞仪技术(flowcytometry, FCM)研究奥曲肽对人结肠癌SW480细胞凋亡的影响。4应用流式细胞仪技术研究奥曲肽对人结肠癌SW480细胞周期的影响。5应用流式细胞仪技术检测凋亡相关蛋白Fas、Survivin的变化。6应用逆转录-聚合酶链反应(revers transcription PCR,RT-PCR)法检测凋亡相关基因Fas、Survivin mRNA的变化,并用计算机图像分析系统进行半定量分析。结果:1 MTT结果显示,不同浓度的奥曲肽(0.5ug/ml、1 ug/ml、2 ug/ml、4 ug/ml、8 ug/ml、16 ug/ml)作用于人结肠癌SW480细胞12、24、48小时后可以抑制细胞的增殖。在0.5ug/ml-8ug/ml浓度范围内随浓度的增加,抑制作用逐渐加强,且随着奥曲肽作用时间的延长,抑制作用也逐渐加强,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01)。奥曲肽浓度为8ug/ml时抑制作用最强,浓度为16ug/ml的抑制作用较8ug/ml弱。说明奥曲肽对结肠癌SW480细胞的抑制作用在一定浓度范围内呈时间-剂量依赖关系。2不同浓度奥曲肽(0.5ug/ml、2ug/ml、8ug/ml)可诱导结肠癌SW480细胞的凋亡,48小时凋亡率分别为2.120±0.116%、4.350±0.251%、6.520±0.490%。且随着奥曲肽浓度的增加,SW480细胞的凋亡率逐渐增加。与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01)。3不同浓度奥曲肽(0.5ug/ml、2ug/ml、8ug/ml、)作用于结肠癌SW480细胞48小时后,能使G1期细胞百分数明显上升,S期细胞百分数明显下降,使细胞周期停滞于G1期,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。奥曲肽对结肠癌细胞SW480 G2期细胞百分数无明显影响,与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。4不同浓度奥曲肽(0.5ug/ml、2 ug/ml、8 ug/ml)作用于结肠癌SW480细胞48小时后,可以上调Fas mRNA及蛋白的表达,下调Survivin mRNA及蛋白的表达,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1本实验应用MTT比色法检测到奥曲肽对人结肠癌细胞SW480有明显的生长抑制作用。奥曲肽增加到一定浓度后,随浓度的增加抑制作用不再继续加强,提示奥曲肽主要是通过与受体结合发挥作用。2奥曲肽能够诱导人结肠癌细胞SW480凋亡、使细胞停滞于G1期,并在一定浓度范围内呈时间-剂量依赖性。3奥曲肽能够上调人结肠癌细胞SW480中Fas mRNA及其蛋白的表达,下调Survivin mRNA及其蛋白的表达。4奥曲肽诱导人结肠癌细胞SW480的凋亡可能与引起G1期细胞阻滞、上调Fas mRNA及其蛋白的表达,下调Survivin mRNA及其蛋白的表达有关。