肺癌是当今世界上发病率和致死率最高的恶性肿瘤,全球范围内,肺癌已经占据了恶性肿瘤致死率的榜首。甚至总和超过了乳腺癌、前列腺癌和结直肠癌。2017年,全中国共有393万人被确诊患有癌症,平均每分钟就有7.5人患癌,每天大约有10000人被确诊患有癌症。在这些癌症患者中,肺癌、胃癌、结直肠癌、肝癌、乳腺癌的患者数量位于前5位。根据国家癌症中心数据统计,所有的恶性肿瘤患者中,肺癌患者占78.7%,其次是胃癌:40.3%,结直肠癌:38.8%,肝癌:37%。患癌率最低的分别是子宫颈癌:11.1%,脑瘤:10.6%,胰腺癌:9.5%。根据以上数据分析后发现,肺癌的患癌率几乎是宫颈癌、脑瘤、胰腺癌等低发肿瘤的7倍左右。不仅仅如此,肺癌在男性当中最为高发,而在女性患者中仅次于乳腺癌。这都说明了,肺癌已经成为了威胁人类健康最为致命的“杀手”。所以,对于肺癌发生机制研究,寻求新的治疗靶点是刻不容缓的。在恶性肿瘤的研究中,我们发现:Raf蛋白激酶的基因突变是正常细胞癌变的主因之一。Raf蛋白激酶还存在着3个亚型:(A、B和C)-Raf。每个亚型突变都在在不同种类的癌症中起到了作用。研究数据分析后发现,C-raf与肺癌中的小细胞肺癌联系非常密切。与此同时,其还在肺癌的组织中表达量异常。这就提示我们,C-raf蛋白激酶和期相关的结合蛋白可能是我们寻找的潜在新靶点。C-Raf和其相关的蛋白质具体是通过怎样的途径影响着肿瘤的发生,这是我们需要密切关注的。在今年来的研究表明,有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路传递着很多不同类型的信号,也介导了很多的细胞功能。除了细胞生长、增殖、细胞分化、细胞转移等反应外,同时也控制着免疫系统应答和神经元传递。Raf-MEK-ERK1/2信号通路是细胞细胞传导细胞信号的一条主要路径。正常细胞癌变的主要因素之一就是该信号通路的异常传导、异常调控。RCN2(Reticulocalbin2)是广泛存在于高级动物细胞中的分泌蛋白,其是CREC蛋白家族的重要成员,该家族其他成员包括RCN2都是通过与体内的第二信使钙离子结合从而介导着不同类型的细胞功能。这些细胞功能包括:细胞生长、细胞迁移,细胞分化等。不仅如此,它还介导了癌细胞的侵袭和异常分化等。不仅如此,RCN2还可以和不同的蛋白质结合,介导着不同种类的疾病。包括维生素D的吸收,胚外内胚层的分化、介导蛇毒毒性的发挥。还在肝癌,结直肠癌,宫颈癌中表达异常。虽然目前已经有证据表明RCN2在多种癌症中起到了关键作用,但是目前还没有研究表明其在肺癌中的作用。本文发现C-raf可以特异性结合RCN2,所以在体外实验中构建了RCN2的过表达和敲除的细胞系。并且在构建好的细胞系中开展了包括细胞划痕实验,细胞干性成球实验,TRANSWELL实验、化学药物敏感新实验。实验后发现,在肺癌H1299细胞系为基础构建的沉默细胞,增殖速度下降,对依托泊苷,顺铂等化学药物敏感。而在细胞划痕实验、TRANSWELL实验中发现,敲除的H1299细胞迁移明显受到了抑制。在细胞干性成球实验中,发现H1299敲除细胞呈球形明显降低。与之相反的是,过表达RCN2的H1299细胞则表现出了相反的结果。本文研究表明,RCN2在肺癌H1299细胞中起到了重要的作用,敲除RCN2后发现,细胞的生长,细胞迁移、细胞干性等都会受到抑制,并且对依托泊苷,顺铂等化学治疗药物较为敏感。而过表达的则刚好与之相反。目前还没有研究过RCN2在肺癌中的作用,而本研究对于RCN2在肺癌中的发病机理进行了初步探究。实验结果表明,RCN2有希望成为肺癌治疗以及诊断的新的药物靶点。