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马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)是马铃薯Y病毒属的成员之一。作物感染马铃薯Y病毒后植株坏死严重，对经济生产造成严重的危害。HC-pro是编码病毒的多功能蛋白，主要参与蛋白酶的加工、蚜虫介导的病毒传播、长距离的系统运输，转录后基因沉默（PTGS）等，近年来在研究上得到了很高的重视。 本研究选取烟草感病品种 LJ925为实验材料，烟草植株接种马铃薯 Y病毒侵染8天后提取烟草总RNA，反转录后获得含hcp基因的cDNA。以改造后的pBI121-GFP为母本质粒，运用In-Fusion基因克隆法构建pBI121-GFP-hcp植物表达载体。通过农杆菌介导法转化烟草感病品种LJ925，从中选出60株进行PCR检测，43株鉴定为阳性植株。取7株转化株总 RNA，反转录为 cDNA后通过qRT-PCR检测hcp基因的表达，结果显示qRT-PCR检测出Ct值较高且彼此之间无明显差异。对以上植株用摩擦接种的方式接种马铃薯 Y病毒，15天后用qRT-PCR检测PVY vpg基因相对表达量，结果显示7号转化植株Ct值与对照株相比略有上升，说明该转化株中马铃薯Y病毒 vpg基因相对表达量较高，转基因对该植株抗病力无明显影响。大部分转基因植株Ct值高于对照株，说明转基因使大部分植株抗病力有一定的提升。用荧光显微镜检测HC-pro蛋白表达量，结果显示目标蛋白主要定位于叶绿体。7号转化植株在细胞内有明显的荧光信号，可能因为hcp基因转入烟草后在蛋白水平上表达量较高，HC-pro蛋白发挥了RNA干扰沉默抑制子作用阻断了RNAi路径，使转基因烟草感病更加严重；其余转化植株在细胞内的荧光信号较弱，可能宿主启动RNA干扰路径，病毒RNA降解。