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黄曲霉毒素(Aflatoxin,AFT)是黄曲霉和寄生曲霉的次级代谢产物,具有很强的致癌、致突变和致畸性。它广泛存在于食品、饲料、农副产品中,不仅对人类和动物的健康造成极大的危害,同时会带来巨大的经济损失,是食品安全中一个广为关注的问题。现在虽然有很多去除黄曲霉毒素B1(AFB1)的方法,但是现有的物理法和化学法虽然能在一定程度上去除AFT,但是存在降低产品营养价值、感官品质低、易产生副产物、有二次污染、去毒不彻底或需要昂贵的设备等缺陷限制了它们的实际运用。因此,寻找一种安全有效的解毒方法是当前迫切需要解决的问题。在防控真菌毒素中,生物降解,尤其微生物的作用一直受到重视,人们希望借此开发一种安全实用、对食品营养价值无明显影响的去毒方法。本文以AFB1降解菌的分离鉴定为目的,以AFT的结构类似物香豆素为唯一碳源和能源筛选能高效降解AFB1的微生物,并对其发酵液上清的降解特性,以及活性物质的粗分离等方面进行了研究,主要结果如下:(1)以香豆素为唯一碳源的方法,从不同样本中初筛得到86株可以利用香豆素的菌株,通过HPLC方法测定,发现有12株菌的降解AFB1的能力在25%-95%。(2)采用its序列分析,这12株菌分别为镰孢属、青霉属、枝顶孢霉属、碱性翅孢壳属、环带状枝顶孢属、链格孢属、灰白翅孢壳属。(3)Fusarium sp.WCQ3361发酵液上清的降解能力高于细胞和胞内提取物,1 min降解率为70.20%,20 min降解率达到78.81%。在10-90度的降解活性都保持在73.53%以上,最适pH7.0,最佳碳源为玉米粉,最佳氮源为牛肉膏,发酵液上清对热处理非常耐受,煮沸10 min,降解能力没有降低,仍为80.57%,蛋白酶K处理后发酵液上清的降解能力降低了 50%,MTT实验进一步证实了发酵液了上清可以降解AFB1,与之前实验结果相吻合。同时将WCQ3361的发酵液上清处理受AFB1污染的饲料,其降解效率均在60%以上另外通过硫酸铵和离子交换层析,初步分离得到具有降解AFB1能力的活性物质。在饱和度为60%的硫酸铵可以沉淀下来的蛋白的降解活性可达86.62%。通过阴离子交换层析分离得到的蛋白降解能力达57.47%。(4)Acremonium sp.WCQ6A的发酵液上清的降解效果高于活细胞和胞内提取物。加蛋白酶处理发酵液上清后降解作用降低,但是热处理后降解效果无变化。发酵液上清在5 min对AFB1的降解率为74.43%,48 h降解率达到79.36%。在0-80℃的降解能力保持在71.60%以上,最适pH8.0,受金属离子的影响比较明显,Fe3+和Zn2+能够促进AFB1的降解,Ni2+能够明显抑制AFB1的降解。最佳碳源为乳糖,最佳氮源为硝酸铵。(5)Penicillium sp.5952上清的降解效果最强。加胰酶处理后,降解能力降至6.21%,加热处理后降至12.99%。发酵液上清对AFB1的降解效果相对缓慢,24 h降解率达到95.92%。从30℃-50℃,对AFB1的降解率均在92.81%以上,pH值为7.0时降解率最高,为94.99%,Cu2+和Zn2+明显抑制AFB1的降解。菌株发酵了 18 h对AFB1就表现出降解活性,发酵48 h时降解率为94.91%。利用葡糖糖、麦芽糖、乳糖、山梨醇、玉米粉和蔗糖这6种发酵后降解率均在89.19%以上,利用肉蛋白胨、胰蛋白胨、大豆蛋白胨、酵母提取物和硝酸铵5种氮源发酵后降解能力均在91.25%以上。