化疗药物通过作用于细胞不同的增殖阶段,从而抑制或杀死肿瘤细胞是目前抗肿瘤治疗的主要手段之一。然而,由于在肿瘤部位缺乏特异性蓄积和渗透性差导致化疗药物具有严重的系统毒性和疗效降低。因此,本文通过合成氧化还原敏感的小分子前药紫杉醇-齐多夫定PTX-AZT（PZ）连接AS1411适配体并包载拉帕醌（LAP）,制备了 PTX-AZT/LAP/AS1411/DSPE-PEG（PZ/LA）纳米粒。一方面,PZ/LA纳米粒避免使用毒性较大的增溶剂并同时提高PTX的溶解性。另一方面,LAP在肿瘤部位NQO1辅酶的作用下产生细胞毒性的活性氧（ROS）,避免光照的穿透性不足等问题,实现与紫杉醇（PTX）协同治疗效果,从而提高PZ/LA纳米粒的治疗效果。同时,氧化还原敏感性的小分子前药PZ在肿瘤部位由于较高的GSH浓度实现刺激响应性药物释放,防止药物过早泄漏。AS1411是含有56个碱基的单链核酸适配体,与肿瘤部位高表达的核仁蛋白特异性结合,提高PZ/LA纳米粒在肿瘤部位的蓄积。课题研究主要内容和结果包括以下五部分内容:1.氧化还原敏感性小分子前药PZ的合成及表征以胱胺为连接臂,通过酯化反应和酰胺化反应将羧基化的紫杉醇PTX-SA（PS）和羧基化的齐多夫定AZT-SA（ZS）连接到两端,产率分别为92%和90%。利用核磁共振氢谱法（1H-NMR）、傅里叶变换红外光谱法（FT-IR）、质谱法（MS）及高效液相色谱法（HPLC）验证了上述物质成功合成。2.PTX-AZT/DSPE-PEG（PZ/DP）、LAP/DSPE-PEG（LAP/DP）、PTX-AZT/LAP/DSPE-PEG（PZ/LAP）和 PTX-AZT/LAP/AS1411/DSPE-PEG（PZ/LA）纳米粒的制备及理化性质考察通过纳米沉淀法制备了不同纳米粒,并对PTX和LAP的投料比进行了处方筛选。LAP/DP纳米粒中,LAP的载药量仅有10.6%。且PZ/DP和LAP/DP粒径分布不均匀。而PTX和LAP共载时,当PTX和LAP的摩尔比为1:1,由于π-π相互作用,LAP具有更高的载药量,为30.78%。粒径为107.9±0.92 nm,PDI为0.184±0.003,分布均匀,形态呈规则球形。3.连接AS1411适配体适配体是一种类似于抗体的受体,AS1411适配体可以与肿瘤部位高表达的核仁蛋白特异性结合。基于碱基互补配对原则,AS1411以A-T碱基模式通过氢键与核苷类药物齐多夫定（AZT）连接在一起,从而实现靶向治疗的目的。PZ/LA纳米粒的粒径为 153.4±4.18 nm,PDI 为 0.156±0.05,CAC 值为 0.0104 mg/mL。TEM结果中,PZ/LA纳米粒外周增加了一层膜,表明AS1411适配体的成功连接。此外,采用动态膜透析法考察了纳米粒中药物在pH=7.4含或未含DTT条件下的释放特性。在含有10mMDTT的介质中,PTX和LAP均释放的更快,呈氧化还原敏感性。4.PZ/LA纳米粒的体外抗肿瘤效果评价以人乳腺癌细胞（MCF-7细胞）和黑色素瘤细胞（B16细胞）为模型,通过MTT法考察了游离药物和不同纳米粒的细胞毒性。PZ和LAP在MCF-7细胞和B16细胞中的CI（Combination Index）值分别为0.53、0.28,表现出协同治疗效果。同时,不同体积比的PTX和LAP的细胞毒性结果也表明两者具有协同联合治疗效果。相比于游离香豆素6（C6）和PZ/LAP纳米粒,PZ/LA纳米粒细胞摄取能力更强,说明AS1411可以提高纳米粒在肿瘤部位的蓄积。加入不同浓度的NQO1辅酶抑制剂双香豆素（Di）时,MCF-7和B16细胞产生ROS的能力呈不同程度的降低。此外,利用AnnexinV-FITC/PI试剂盒定性和定量的考察了 PTX、PZ、PZ/LA诱导细胞凋亡的能力。最后,细胞周期阻滞试验结果表明PTX、PZ、PZ/LA可以在不同程度将细胞阻断在G2/M期。5.PZ/LA纳米粒的体内抗肿瘤效果评价在B16细胞建立的荷瘤小鼠模型中,每隔两天尾静脉注射一定量的生理盐水（NS）、Taxol、PZ/LAP和PZ/LA。给药14天后,剖离出主要器官和肿瘤组织,用于组织病理切片染色分析。最后,以二烷基碳菁类染料DiR为荧光物质,通过小动物活体成像仪实时观察游离DiR和PZ/LA纳米粒在小鼠体内的分布。定性定量分析结果显示,较游离DiR,PZ/LA纳米粒在肿瘤部位蓄积更多。以上结果表明PZ/LA纳米粒在体内具有较好的抗肿瘤效果。