研究背景:间皮细胞覆盖在浆膜腔及腔内脏器的表面,具有屏障、免疫、物质转运等功能。淋巴孔是毛细淋巴管在浆膜间皮细胞之间的微小开口,通过淋巴孔,浆膜腔与淋巴管系直接相通。淋巴孔具有物质吸收、免疫等功能。肿瘤腹膜转移一般经历细胞游离、粘附、侵袭、生长四个阶段。在肿瘤腹膜转移时,间皮细胞和淋巴孔形态会发生改变。研究目的:研究腹腔接种肿瘤细胞后,膈腹膜、肠系膜上的间皮细胞及淋巴孔在肿瘤腹膜转移过程中不同时期的变化,探讨间皮细胞及淋巴孔在肿瘤腹膜转移过程中发挥的作用。研究方法:小鼠腹腔接种HeA-H细胞后,每天记录体重增长状况,以确定收集腹水的时间点。接种后每两天取一次膈腹膜及肠系膜,扫描电镜观察腹腔接种肿瘤细胞后膈腹膜和肠系膜上间皮细胞及淋巴孔在不同时期的变化。扫描电镜观察用腹水连续处理后膈腹膜和肠系膜间皮细胞及淋巴孔的变化。以Boyden小室法研究HepA-H细胞侵袭能力。以ELISA法测定腹水中VEGF含量。肠系膜消化法培养间皮细胞,建立间皮细胞体外培养体系,为肿瘤转移过程中间皮细胞和淋巴孔的体外研究建立基础。研究结果:小鼠腹腔接种HepA-H肿瘤细胞后,体重较对照组有明显增长,第11天后体重增长减缓,第14天后出现死亡。研究发现肿瘤腹膜转移过程中间皮细胞发生明显肿胀,淋巴孔开放数目增加,孔中可见肿瘤细胞。腹水连续处理后,较之对照组,膈腹膜及肠系膜上淋巴孔开放明显增加,膈腹膜间皮细胞肿胀,绒毛增生,肠系膜间皮细胞边界出现明显微绒毛。Boyden小室测定HepA-H细胞侵袭能力为23.4±1.5%。腹水中VEGF含量为5.43±0.23ng/ml。从细胞形态及免疫荧光两方面的检测,确定肠系膜消化法培养之细胞为间皮细胞。结论:膈腹膜间皮细胞在HepA-H肝癌细胞腹膜转移过程中,细胞体肿胀,间皮细胞间隙增大,微绒毛增生,肿瘤细胞种植于间皮细胞之间。肠系膜间皮细胞形态变化不大,后期可见结节状肿瘤细胞。肿瘤细胞可通过淋巴孔传播。