2型糖尿病肥胖和非肥胖患者T淋巴细胞及亚群的表达

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前言 糖尿病(diabetes mellitus)是因胰岛素分泌绝对或相对不足以及靶细胞对胰岛素敏感性降低引起的糖、蛋白质、脂肪和继发的水电解质代谢紊乱性疾病。目前糖尿病发病甚多,已成为世界第五位死亡原因。2型糖尿病是糖尿病剧增的主要类型。随着我国改革开放、经济发展、人民生活方式的改变和生活水平的不断提高,糖尿病的患病率也日趋上升,糖尿病已成为日益严重的公共健康问题。 一般认为,1型糖尿病是具有一定遗传基础的,是在多种环境因子触发下,有T淋巴细胞介导的器官特异性自身免疫性疾病。2型糖尿病的病因目前尚不十分清楚,一般认为该病具有明显的遗传倾向和遗传异质性。近年来对免疫细胞的大量研究发现T淋巴细胞介导的免疫病理作用在糖尿病的发生发展中起相当重要的作用。本实验分别对2型糖尿病中肥胖和非肥胖患者外周血T淋巴细胞及亚群进行了测定,现报告如下。 实验材料 标本来源:所有实验组血样均取自我院内分泌病房。按照1997年ADA制定的糖尿病诊断标准选择2型糖尿病患者46例。其中根据体重指数(BMI)的不同分为两组,BMI>27为肥胖组19例,其中男性12例,女性7例,年龄30~64岁,平均47.84±8.54岁,病程15天~15年,平均5.02±4.33年。BMI<23为非肥胖组27例,其中男性14例,女性13例,年龄39~73岁,平均57.48±10.09岁,病程10天一20年,平均8.ZIt 6.15年。以上均无已知的免疫系统疾病和急慢性感染病史。对照组血样取自于我院体检中心的职工体检健康者,年龄19一叩岁。Bm>27为肥胖健康对照 12例,其中男性 7例,女性 5例。BMI<23为非肥胖健康对照13例,其中男性8例,女性5例。采血方法:采肘静脉血3Inl,置于肝素抗凝管内,用单克隆抗体标记分离出的淋巴细胞。为避免淋巴细胞死亡,需立刻送流式细胞仪检验。 实验仪器和试剂:主要仪器为流式细胞仪、离心机、振荡器等。主要试剂有鼠抗人PE-CD。单克隆抗体、鼠抗人FITC-CD。单克隆抗体、鼠抗人FITC-CDs单克隆抗体(法国Immunotech公司广淋巴细胞分离液。 实验方法 操作过程:将抗凝血离心后缓慢移人淋巴细胞分离液上,2500r/min离心10ndn,分离出淋巴细胞,分别加人3只试管,标记为\2J管,l管加人CD八CD。免疫荧光抗体各10…,2管加人CD卜*k免疫荧光抗体各*…,3管不加人任何抗体。振荡ZO秒使之充分混合。将血样置于4℃下孵育30-45分钟,加 PBS液 lrnl漂洗,3000 r/min离心 5 min,反复 3次,将样本送到流式细胞仪内检测,并记录实验结果。 实验结果 2型糖尿病肥胖患者的T淋巴细胞及亚群检测结果如下:CD。”,分布48.15-87.46,平均70.10 L 10.67;CD。“,分布21。皿一69.00,平均 38.49。二二.25;CDs”,分布 11.47-33.77,平均 23·08 L 4.93,CD。/CDs,分布0.86-4.86,平均1.77。0.84。2型糖 ·2·尿病非肥胖患者的T淋巴细胞及亚群检测结果如下:CD/,分布46.92-78.66,平均61.46 Lg.52;CD。”,分布22.18-54.17,平均36.34。9.41;CD。”,分布7.94-28.41,平均 16.14。6.00;CD。/CD。,分布0.82-4.60,平均2.50 LI.40。月胖健康对照人群的T淋巴细胞及亚群检测结果如下:CD3\分布 59.15-82.85,平均70.16。6.56;CD。”,分布 32.29-49.04,平均 40.78。4.97;CDs”,分布ZI.36-31.58,平均26.13土3.15;CD4/CD。,分布1.38-2.13,平均 1.57。0.12。非肥胖健康对照人群的 T淋巴细胞及亚群检测结果如下:CD3”,分布63.39-82·47,平均7且.3且。5·8二;CD。”,分布 32.47-43.34,平均 39.49。3.74;CDs”,分布 20.61-28.92,平均26.16 2 2.57;CD./CD。,分布二.13-1.78,平均互.52刊.14。使用SPSS医学统计学软件对肥胖组及非肥胖组进行t检验结果如下:厂如型糖尿病肥胖患者与肥胖健康对照外周血T淋巴细胞及亚群各CD抗原的P值均>O.05,两者相比无统计学差异。p万型糖尿病非肥胖患者与非肥胖健康对照外周血T淋巴细胞及亚群P值分别为:(民”,P<O.001;C民”,P>0·05;*几”,P<O.00二;m。/*0s,P<o.0二;两者相比 *几”的细胞数无统计学差异,而CD厂JD/细胞数及CD/CD。值均具有显著的统计学差异。根万型糖尿病肥胖患者与非肥胖患者外周血T淋巴细胞及亚群 P值分别为:CD3“,P<0.01;CD4”,P>0.05;CDS”*<0.00;C民/Ck,P<0.05;两组C民”的细胞数无统计学差异,而c民”工厂细胞数及on。,on。比值具有显著的统计学差异。N川胖与非肥胖健康对照外周血T淋巴细胞及亚群各CD抗原的P值均>O.05,两组相比结果无统计学差异。 讨 论 众所周知J淋巴细胞是机体最重要的免疫细胞群,在正常机 ·3·体内各T淋巴细胞亚
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