[目的]分离纯化五种结核分枝杆菌分泌性蛋白（30-kDa,38-kDa,ESAT-6,Rv3872 and HBHA）,比较这五种蛋白及三种联合蛋白（38-kDa-30-kDa Ag,38-kDa-ESAT-6 Ag,38-kDa-HBHA Ag）的免疫学特性,并评价其在结核病血清学诊断方面的应用价值。为开发新型结核分枝杆菌诊断性试剂,提供理论依据。[方法]应用硫酸铵盐析作用、疏水作用和阴离子交换作用从结核分枝杆菌培养滤过液中分离纯化30-kDa和38-kDa蛋白:应用金属螯合NI²⁺-NTA琼脂亲和层析作用从结核分枝杆菌培养滤过液中分离纯化ESAT-6、Rv3872和HBHA蛋白。在肺结核患者和正常对照组血清中,利用间接酶联免疫吸附试验,评价五种结核分枝杆菌分泌性蛋白及其三种联合蛋白的免疫原性。[结果]成功分离纯化了5种分泌性蛋白。并且在酶联免疫吸附试验中,38-kDa抗原与其他四种结核分枝杆菌分泌性蛋白比较,具有较强的敏感性和特异性,尤其在抗IgM抗体的诱导免疫反应最强（P＜0.0001）,其敏感性和特异性分别为44.44%和95%。而在38-kDa与30-kDa联合抗原中敏感性高达80%,并且也具有较高的特异性。结果还显示出,ESAT-6抗原和肝素结合血凝黏附素（HBHA）抗原,在与三种抗体的反应中,具有相似的敏感性与特异性。Rv3872抗原比其他四种抗原的敏感性和特异性均低。[结论]1.作为结核分枝杆菌分泌性蛋白单一抗原,38-kDa抗原的免疫原性优于其他四种抗原（30-kDa,ESAT-6,Rv3872 and HBHA）。2.38-kDa与30-kDa联合抗原,有希望成为结核病血清学新型诊断试剂有效的候选抗原。