卵孢白僵菌防治蛴螬及其固态培养条件优化

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作为一类地下害虫,蛴螬的防治较为困难。化学防治效果不佳,且长期施药使蛴螬产生抗药性,同时带来污染环境和食品安全等一系列问题。随着生物防治研究的深入,地下害虫的防治工作有了新的突破。白僵菌作为产品商品化,施用剂型广泛的生物杀虫剂,具有环保安全、药效持久等特点,对蛴螬防治具有良好效果,另外其寄生范围较广,对于其他地下害虫也具有灭杀效果,具有较高的田间实用价值。试验以东北农业大学区域主要金龟成虫消长规律调查,白僵菌及与化学杀虫剂混用的可行性研究和白僵菌固态培养条件优化设计为研究内容,旨为进一步应用白僵菌在哈尔滨地区防治蛴螬提供理论依据和实践指导。本论文主要研究结果如下:1.哈尔滨市东北农业大学区域主要金龟子成虫消长动态的调查结果哈尔滨市东北农业大学区域主要金龟子种类有阔胫绒金龟(Maladera ovatula Fairmaire)、黄褐丽金龟(Anomala exoleta Faldermann)、东北大黑鳃金龟(Holotrichi adiomphalia Bates)、棕色鳃金龟(Holotrichiatitanis Reitter)、暗黑鳃金龟(Holotrichia parallela Motschulsky)、黑绒鳃金龟(Serica orientalis Motschulsky)和铜绿丽金龟(AnomalacorpulentaMotschulsky)等。其中优势种群为诱阔胫绒金龟和黄褐丽金龟。阔胫绒金龟成虫发生期为6月下旬日至7月下旬,盛发期在7月中旬;黄褐丽金龟成虫发生期为在6月下旬至8月下旬,盛发期在7月末至八月初。阔胫绒金龟成虫数量与发生期的日均气温呈正相关,而与总降水量负相关。2卵孢白僵菌(NEAU30503)与不同农药品种和农药浓度混合对其萌发和生长影响较大。白僵菌在辛硫磷300、1000倍液和毒死蜱300倍液中不能萌发生长;毒死蜱与辛硫磷3000倍液和高效氯氟氰菊酯2000、6000倍液对白僵菌萌发没有影响。随着农药浓度的增加,对白僵菌萌发的抑制作用有增强趋势。有机磷农药辛硫磷对白僵菌萌发影响最大,有机磷农药毒死蜱次之,而拟除虫菊酯类农药高效氯氟氰菊酯对白僵菌萌发影响最小。3种农药对白僵菌的生长均存在抑制作用,但不同浓度对白僵菌生长的抑制作用差异不显著。3.测定了卵孢白僵菌及其与农药混用对蛴螬的防治效果通过对不同浓度卵孢白僵菌(NEAU30503)孢子悬浮液对蛴螬的生物测定,以商品卵孢白僵菌和绿僵菌作为参照,结果表明:在2.5×1010孢子数/L和1.25×1011孢子数/L浓度的卵孢白僵菌(NEAU30503)下蛴螬的致死率分别为67.3%和79.9%,且均不低于参考菌株,具有较好的防治效果,可用于蛴螬的生物防治。通过两种化学杀虫剂及其与卵孢白僵菌混用的生物测定得出,毒死蜱与白僵菌混用毒土的LT50和LT90分别比单剂提前2.1d和4.6d,5d后校正死亡率较农药单用提高22.2%,较菌剂单用提高更为显著,毒死蜱和白僵菌混用表现出明显的增效作用,而高效氯氟氰菊酯与白僵菌混用增效作用不明显。田间小区试验表明卵孢白僵菌对蛴螬防治与传统化学防治无明显差异,有较好的防治效果。4卵孢白僵菌(NEAU30503)固态培养条件的优化在单因素试验确定最优基质配方、含水量、接种量、培养温度和时间的范围基础上,采用Box-Behnken试验设计和响应面分析方法得出最优固态培养条件为:配方D(蛭石:麦麸:玉米粉)的产孢量最高,达到3.075×109孢子/g,烘干后为9.97×109孢子/g,含水量为55%,接种量为15ml/100g,培养温度为27℃,培养时间为7.5d,在此条件下卵孢白僵菌(NEAU30503)烘干前单位产孢量达3.7×109孢子/g。
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